Human IL-10 ELISA Kit

检测原理：

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人IL-10抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的IL-10与固相抗体和检测抗体结合，形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物，避光显色。加入终止液终止反应，在450 nm波长(参考校正波长540nm或570nm)测定吸光度值。

检测类型：双抗夹心法

形式：预包被96孔板

检测样本类型：细胞上清液，血清，血浆

上样量：100ul

试剂盒组分：

预包被96孔板、标准品、IL-10检测抗体、稀释用缓冲液、显色液（A、B）、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。

灵敏度：3.9pg/mL

检测范围：31.2 - 2,000 pg/mL

回收率范围：88-110%

保存方法：2-8℃

标准曲线图

背景：

人白细胞介素10（IL-10），又称为细胞生长因子合成抑制因子（CSIF），是IL-10α螺旋家族的成员，该家族还包括IL-19、IL-20、IL-22、IL-24和IL-26/ak155。IL-10可由多种活化的造血细胞、肝星状细胞、角质形成细胞和胎盘滋养叶细胞分泌。人类IL-10对小鼠细胞有活性，而小鼠IL-10不能作用于人的细胞。成熟的人IL-10与马IL-10有86%的氨基酸序列同源性，与牛、犬、猫、豚鼠、小鼠、绵羊、猪和大鼠IL-10的同源性在72-80%之间。它包含两个链内二硫键，以非共价结合的同源二聚体形式表达，分子量36kDa。

IL-10通过由II型细胞因子IL-10受体亚基α和β异源二聚体复合物介导其生物活性。IL-10受体α亚基是一个110kDa的跨膜糖蛋白，主要表达于淋巴细胞、NK细胞、巨噬细胞、单核细胞、星形胶质细胞、肠上皮细胞、滋养层细胞和活化的肝星状细胞，而75kDa的跨膜受体β则广泛表达。IL-10二聚体结合两个IL-10 Rα链，激发两个IL-10 Rβ链的加入。IL-10 Rβ不直接结合IL-10，但为信号转导所需要。IL-10 Rβ还与IL-20 Rα、IL-22 Rα1及IL-28 Rα形成IL-22、IL-26、IL-28和IL-29的受体复合物。

IL-10参与的免疫调节包括抑制作用和刺激作用。它通过抑制Th1细胞和Th17细胞的扩增和活化，促进M2型巨噬细胞发挥抗炎作用。免疫调节T细胞（Treg）和调节性B 细胞对IL-10表达的调节对Treg增殖有重要意义。然而，在肿瘤环境中，IL-10抑制Treg及髓源性抑制细胞的增殖。IL-10诱导CD8 T细胞在肿瘤中的积累和活化。IL-10通过限制关节炎的组织损伤，促进肌肉损伤后再生发挥保护作用，但它可能导致病毒感染的持久性。IL-10水平在干燥综合征（唾液）、原发性中枢神经系统淋巴瘤（脑脊液）、卵巢癌（血清和腹水）中升高。其水平在心脏病复发或子娴前期患者血清和男性不育患者精液中降低。

IL-1α和IL-1β是结构相关的多肽，在氨基酸水平约有25%的同源性。两者都是先合成为31kDa前体，然后裂解为大约17.5kDa的成熟蛋白。由Caspase-1/ICE对IL-1β的前体切割是炎症反应的关键步骤。尽管IL-1α和IL-1β都不含有一个典型的疏水信号肽，但有证据表明，它们可以经非经典途径分泌到胞外。未处理的IL-1α部分可在细胞膜上展示，并可能保留生物活性。与IL-1β前体不同，IL-1β前体与成熟的IL-1β相比，具有很少或根本不具有生物活性。IL-1β前体与成熟的IL-1β都运至胞外。

IL-1α和IL-1β通过免疫球蛋白超家族受体与IL-1RA结合发挥其效应。80kDa的I型跨膜受体（IL-1RI）在多种细胞中表达，包括T细胞、成纤维细胞、角质形成细胞、内皮细胞、滑膜衬里细胞、软骨细胞和肝细胞。68kDa的II型跨膜受体（IL-1RII）在B细胞、中性粒细胞和骨髓细胞中表达。IL-1RI和IL-1RII的胞外区域享有28%的同源性。但其他区域有显著不同：II型受体的胞内域只有29个氨基酸，而I型受体的胞内域有213个氨基酸。IL-1RII似乎对IL-1信号没有响应，其功能是作为诱骗受体从而削弱IL-1的作用。IL-1受体配体蛋白（IL-1RAcP）与IL-1RI相互作用是IL-1RI信号传导所必需的。IL-1RA是分泌型分子，是IL-1的竞争性抑制剂。可溶性IL-1RI和IL-1RII存在于人的血浆、关节液、及几种细胞株的条件培养基中。此外，牛痘病毒编码类似于可溶性IL-1RII的IL-1结合蛋白。