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Human IL-8/CXCL8 ELISA Kit

Human IL-8/CXCL8 ELISA Kit

型    号: abs510004
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Human IL-8/CXCL8 ELISA Kit;人IL-8/CXCL8 ELISA试剂盒

abs510004Human IL-8/CXCL8 ELISA Kit的详细资料:

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人IL-8抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的IL-8与固相抗体和检测抗体结合,形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物,避光显色。加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考校正波长540nm570nm)测定吸光度值。

检测类型:双抗夹心法

形式:预包被96孔板

检测样本类型:细胞上清液,血清,血浆

上样量:100ul

试剂盒组分:

预包被96孔板、标准品、IL-8检测抗体、稀释用缓冲液、显色液(AB)、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。

灵敏度:7.8pg/mL

检测范围:31.2 - 2,000 pg/mL

回收率范围:96-118%

保存方法:2-8

标准曲线图

 

背景:

白细胞介素-8IL-8,也称GCP-1NAP-1CXCL8)是属于α型或CXC家族的8-9kDa的趋化因子,可与肝素结合。目前为止,共发现了15种人的CXC家族蛋白,大小在8-12kDa之间。绝大多数位于人类4号染色体,都具有典型的三β折叠层/一个α螺旋结构,多数在N端显示Glu-Leu-Arg三肽基序。人IL-8先合成为一个99氨基酸前体,其中包含一个20氨基酸的信号序列,和一个79个氨基酸的成熟区域。它可作为单体、同源二聚体、及与CXCL4/PF4形成的异源二聚体在体内循环。IL-8单体被认为是具有生物活性的,而异源二聚体可能会增强PF4的活性。在氨基酸水平,成熟的人IL-8与猪和犬分别有65%70%的同源性。在啮齿动物中,IL-8的相应基因尚未发现。通过选择性剪接和差别蛋白水解产生了多种IL-8亚型。选择性剪接发生在C-端,那里有一个11个氨基酸替代(位置在aa#92-99)。蛋白酶水解作用可能是一个细胞的特定事件,它在IL-8N-端产生截断。例如,成纤维细胞和血管内皮细胞将第21和第22氨基酸切断,形成IL-8,而单体细胞和淋巴细胞在第21-25氨基酸切割,产生IL-8。这些短式IL-8一般来说具有更高的生物活性,尤其是针对CXCR 1IL-8受体的活性增高。大约15%IL-8在前体Arg27位发生了瓜氨酸化,这可提高IL-8的半衰期和促使白血球增多。很多类型的细胞都分泌IL-8,其中包括单核细胞和中性粒细胞、成纤维细胞和角质形成细胞、肥大细胞、内脏平滑肌细胞、树突状细胞、II型大肺泡细胞和内皮细胞。

IL-8受体有两个,都属于G蛋白耦联受体蛋白:CXCR1/IL-8RACXCR2/IL-8RB,二者之间的氨基酸序列享有77%同源性。CXCR1分子量为45-50kDa,几乎完全由IL-8独享;CXCR2分子量为35-40kDa,由所有的CXC趋化因子所共有。CXCR1CXCR2分别形成组成型同源二聚体,这似乎是它们的功能性构型。当同一个细胞表达时,异源二聚体也会形成;但当它与IL-8结合后便会被解体。CXCR2对低浓度IL-8有响应,且主要与趋化和MMP-9释放有关。与此相反,CXCR1对高浓度IL-8有响应,并与呼吸爆发及磷脂酶D2的激活有关。因此,在中性粒细胞CXCR2被认为可引导中性粒细胞迁移到炎症部位,然后引发CXCR1介导的抗菌活性。

IL-8最著名的功能是它在免疫细胞中的促炎作用。从本质上讲,IL-8是由暴露于炎性刺激因子的多种细胞类型分泌。对于单核细胞/巨噬细胞来说,微生物的暴露引起IL-8的释放;随后,CXCR2介导的趋化作用将中性粒细胞迁移到抗原攻击的部位,并伴随下一步抗菌活性的激活及启动。IL-8可增强骨髓M-CSF的作用,从而引起粒细胞的成熟和释放。IL-8的这两个功能相辅相成。有报道说,IL-8对肿瘤相关的内皮细胞具有血管生成功能。此时,肿瘤源性的IL-8可以采取一种旁分泌方式激活血管内皮细胞的CXCR1CXCR2CXCR1CXCR2都与PI3-K/AktRasGTP信号通路相关,参与细胞的存活和增殖。此外,IL-8正调节VEGFR2EGFR属于介导细胞生长和迁移的受体络氨酸激酶。


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