什么是膜蛋白?膜蛋白是细胞膜的重要组成部分,负责许多关键的生物学功能如物质运输、信号转导和细胞间识别等,人类基因组中编码的膜蛋白约占总蛋白质组的25%左右。它们可以根据其与膜的结合方式和功能特点被分为不同的类别。以下是膜蛋白的一些主要类型和功能:1、膜蛋白分类外在膜蛋白:这些蛋白分布在细胞膜的内外表面,约占膜蛋白的20%-30%,主要在内表面。它们通过离子键、氢键与膜脂分子的极性头部相结合,或通过与内在蛋白的相互作用,间接与膜结合,大多是亲水性蛋白,主要的类型有酶类、受体蛋白...
在当今生物医学研究领域,精准、高效地识别和追踪目标分子是解锁疾病机制、开发新型药物以及推动个性化医疗的关键。抗体/蛋白标记技术作为一种强大的工具,在这一过程中发挥着不可替代的作用。通过将特定的化学标签(如荧光染料、酶或放射性同位素)与抗体或蛋白质共价结合,研究人员能够以更高的灵敏度和特异性对复杂生物系统中的目标分子进行可视化和定量分析。常见抗体/蛋白标记技术荧光素标记:使用荧光素如AlexaFluor系列(AF488\AF594\AF647等)、Cy系列(Cy3\Cy5\Cy...
小伙伴们在上篇学习了ELISA实验的原理、类型,并且根据自己的需求选择了适合自己的试剂盒,那接下来就是ELISA的实操了,包括哪些实验步骤和注意事项呢?快来和小爱一探究竟吧!ELISA实验步骤图1ELISA标准实验流程1、样本采集:a)血浆:采集血浆时可使用EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝血剂。采集后30min内,1000xg离心15min。立即检测或分装后于≤-20℃储存。避免反复冻融。b)细胞培养上清液:通过离心去除颗粒,立即检测或分装后将样品于≤-20°C储存。避免反复...
作为常见实验技能之一的ELISA已经成功逼疯了一大批研究生:加样加到手抽筋,拍板拍到人发疯。为此,小爱呕心沥血写了一份ELISA实验详解,原理、步骤、注意事项一网打尽,帮助各位小伙伴快速入门并精通ELISA(分为上下两篇噢)。ELISA实验原理酶联免疫吸附试验(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay,简称ELISA),是一种利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法,是免疫学经典实验方法。ELISA可适用多种样本类型,主要包括血清、血浆、细...
提到细胞凋亡,想必大家都不陌生,咱们这个领域的,先不说本科的时候学过,考研的时候怎么说它也是重要考点之一。或许此时您的脑袋瓜子里立马浮现出课本上那个经典的凋亡信号通路图......额,还有点记不清......没关系,今天小编带您回顾一下经典的细胞凋亡信号通路,再看看它常见的检测方法。☆细胞凋亡1)细胞凋亡是一种细胞主动有序的死亡,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等作用,它并不是病理条件下自体损伤的一种现象,而是为了更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡。2)细胞凋亡相关信...
什么是TR-FRET?TR-FRET(Time-ResolvedFluorescenceResonanceEnergyTransfer,时间分辨荧光共振能量转移)是一种用于研究分子间相互作用的生物物理技术。它结合了两种技术:荧光共振能量转移(FRET)和时间分辨荧光(TRF,Time-ResolvedFluorescence)。荧光共振能量转移原理图荧光共振能量转移(FRET)是一种物理现象,其中一个荧光分子(供体)在吸收光能后,可以将激发能量非放射性地传递给另一个分子(受体...
它们的概念分别是什么?PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR这四种技术都是基于聚合酶链式反应(PCR)的技术,但是它们之间存在一些区别。PCR:聚合酶链式反应(PCR)是一种体外扩增DNA分子的技术,利用DNA聚合酶和多个引物在所需温度下扩增目标DNA分子。PCR反应分为三个阶段:预变性、变性-退火-延伸和延伸。PCR技术主要用于DNA序列的扩增和检测,应用广泛,如基因克隆、DNA序列测定等。qPCR:实时定量聚合酶链式反应(qPCR)是一种实时检测PCR过程中荧光信...
在生物学实验中,二抗的选择至关重要。其中,HRP酶标二抗和荧光二抗是两种常见的二抗类型,它们各具特色,并在不同的实验场景下发挥着关键作用。一、HRP酶标二抗1.定义及特性HRP酶标二抗,即辣根过氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP)标记的二抗,是生物学实验常规用的二抗。其特点包括比活性高、稳定性好、分子量小、纯酶容易制备等,因此在免疫学实验中广泛应用。2.应用场景HRP酶标二抗常用于如免疫印迹(WB)、酶联免疫吸附试验(ELISA)以及免疫组织化学(I...
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