单组分TMB显色液（膜印迹，HRP显色用）

描述

• 酶联免疫分析技术（ELISA）广泛用于抗原、半抗原或抗体的定量或定性分析，辣根过氧化物酶（HRP）及其偶联物是ELISA技术常用的一种酶，能催化底物如TMB发生显色反应，从而进行定量或定性分析。由于TMB比其他显色底物具更高的灵敏度且无致癌性被广泛使用，TMB主要用于ELISA、免疫斑点杂交或免疫组化等实验，也有报道将其用于氯的检测分析。

• 通常TMB显色试剂由多个组分构成，必须在使用前进行配制，并且容易产生沉淀，使用相对不便且容易导致检测结果不稳定。本品采用全新的TMB显色技术，将所有相关试剂全部配在一个溶液，即仅由单一溶液组成，不仅简化了操作步骤，而且使检测结果更加稳定可靠。

• 本品专门为免疫印迹实验而设计，其在反应位点处产生紫色不可溶物，背景很少或几乎无背景，用水可终止显色反应。适合用于膜印迹免疫实验，包括WB、斑点杂交、Southern Blot和Northern Blot等HRP的膜显色检测。

• 外观：溶液

产品规格与储存

• abs9194-100ml：100ml，2-8℃避光保存

• abs9194-500ml：500ml，2-8℃避光保存

使用方法

• 膜的HRP显色检测：

• 使用之前，取出适量单组份TMB显色液，使其回到室温再开始使用；

• 参考相应实验步骤，在与HRP标记的抗体孵育一段时间后，用适当洗涤液洗涤3-5次，每次3-5min。

• 洗涤完毕后，去除洗涤液，滴加适量单组份TMB显色液充分覆盖膜。

• 室温避光孵育5-30min或更长时间（可长达数小时），直至显色到预期深浅。注意：建议根据实验需求选择显色时间。

• 直接拍照记录。

常见问题

• 背景显色太深：

• 如果背景（没有样品的对照）显色太深，一方面需考虑使用适当的封闭液进行封闭，如商业化封闭液或者和一抗相同来源的血清（10%）进行封闭。另一方面，使用经过适当吸附的二抗，以减小二抗的非特异性吸附。

• 可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。另外，选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间也会有所帮助。

• 没有显色或显色太弱：

• 适当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果，滴一滴稀释二抗在离心管内，检测二抗是否被正常显色。

• 可以考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如Biotin检测体系。

• 可以适当延长显色时间。

• 如果上述改进不能获得预期效果，对于WB，可以考虑更换效果更好的一抗；对于Southern、Northern Blot等可考虑更换探针。

注意事项

• 本品含TMB和H2O2，对人体有刺激性，请注意防护。

• 如发现本品出现浑浊或颜色变为蓝色，请停止使用。

• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存/保存方法

• 2-8℃避光保存，2年有效。

运输方式

• 蓝冰运输