低丰度靶蛋白总曝不出？极敏型 ECL 解锁飞克级痕量蛋白检测

低丰度靶蛋白总曝不出？极敏型 ECL 解锁飞克级痕量蛋白检测

一、什么是极敏型 ECL 化学发光检测试剂盒？

极敏型ECL化学发光检测试剂盒包含底物 A 液与过氧化物 B 液，等体积混合得到工作液，依靠 HRP 辣根过氧化物酶催化优化型鲁米诺衍生物发生氧化反应释放光子。配方进一步升级增强体系，检测下限可达飞克级别，发光信号强且持续时间久，兼容 CCD 化学发光成像仪与 X 光胶片。专门针对印迹膜上 HRP 标记的抗原抗体复合物，适合含量极低的痕量靶蛋白，可大幅提高一抗、二抗稀释倍数，节约珍贵抗体试剂。

二、和普通、超敏 ECL 相比具备哪些技术差异？

普通 ECL 多用于高丰度蛋白，灵敏度为纳克中等皮克级；超敏 ECL 可达到低皮克级；极敏 ECL检测下限进一步下探至飞克级，允许抗体更高倍数稀释，能够节约抗体消耗。极敏 ECL 面对痕量、磷酸化修饰、免疫共沉淀低丰度产物优势明显；但灵敏度较高，若洗膜不充分容易出现非特异背景。实验中可根据蛋白丰度选择发光液，高丰度样本不建议直接使用极敏 ECL，避免条带过曝，需搭配内参完成半定量分析。

三、极敏型 ECL 试剂盒适用于哪些科研实验？

极敏型ECL化学发光检测试剂盒仅用于科学研究，不可用于临床诊断，适配 PVDF、NC 印迹膜。主要用于 Western Blot 检测样本中痕量总蛋白、低丰度磷酸化等翻译后修饰蛋白；适合 CoIP 免疫共沉淀产物、少量珍贵临床动物样本；也可用于 DotBlot、高灵敏度化学发光 ELISA 实验。A、B 液需要现配现用，孵育时严禁印迹膜干燥，必须充分洗膜控制背景，配合 CCD 成像系统多档曝光采集图像，完成蛋白半定量分析。

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