WB练手包（小鼠）

产品组分

• 10×电泳液：100ml×1

• 10×电转液：100ml×1

• 10×TBST：100ml×1

• 2×上样缓冲液：1ml×1

• PVDF膜（0.45um）：2张

• 显色A液：6ml×1

• 显色B液：6ml×1

• BSA：5g×1

• 脱脂奶粉：5g×1

• 预染marker（#abs923）：20ul×1

• 二抗（anti-mouse-HRP）（#abs20001）：50ul×1

操作步骤

• 取准备好的蛋白裂解液，和2×上样缓冲液等体积混合，混匀后于100度煮10min，12000rpm离心5min，取适量体积上样。

• 电泳：使用配制好的电泳液，90V电泳20min，120V电泳至结束。

• 转膜：使用配制好的电转液，100V恒压电转90min。

• 封闭：用1×TBST配制5%的脱脂奶粉/BSA溶液，将膜置于5%的脱脂奶粉/BSA溶液中，室温摇床上孵育60min。

• 孵育一抗，孵育条件为2-8度摇床上孵育过夜。

• 洗涤，用1×TBST洗3次，每次10min。

• 孵育二抗，孵育条件为室温摇床上孵育60min。

• 洗涤，用1×TBST洗3次，每次10min。

• 显色和曝光，取显色A液和B液等体积混合，将混合后的液体铺满整张膜，反应2min，之后即可进行曝光操作。

溶液配制

• 电泳液：取10×电泳液100ml，加入纯化水，定容至1000ml。

• 电转液：取10×电转液100ml，加入800ml纯化水和100ml无水甲醇。

• 1×TBST：取10×TBST溶液100ml，加入纯化水，定容至1000ml。

储存/保存方法

• 2-8℃保存，有效期6个月。

运输方式

• 蓝冰运输