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品牌 | absin | CAS | - |
---|---|---|---|
分子式 | - | 纯度 | 浓度50× |
分子量 | - | 货号 | abs9247 |
规格 | 100ml | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 石蜡切片;冰冻切片;细胞爬片等 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
产品描述:
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。EDTA抗原修复液(50×)(EDTA Antigen Retrieval Solution (50×))采用了广泛使用的EDTA,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
使用方法:
1、石蜡切片:
(1)脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡 2×5min。无水乙醇 2×5min。90%乙醇 2×5min,70%乙醇 5min。蒸馏水 2×5min。
(2)抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约 10-20min(最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需预热到 95-100℃。加热可以使用水浴锅或微波炉。如果使用微波炉加热,需注意避免修复液暴沸。随后大约在 20-30min 冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5min。即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2、冰冻切片:
用免疫染色洗涤液洗涤切片 5min。抗原修复的过程如石蜡切片的抗原修复过程。
3、其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片的步骤进行。
注意事项:
1、EDTA 抗原修复液(50×)使用前必须用重蒸水或 MilliQ 水稀释 50 倍,配制成抗原修复液(1×)。
2、为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,戴手套等。
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