全国服务咨询热线:

15502157206

Products产品中心
首页 > 产品中心 > 常规生化试剂 > ELISA试剂盒 > abs9217苏木素-伊红(HE)染色试剂盒

苏木素-伊红(HE)染色试剂盒

简要描述:苏木素-伊红(HE)染色试剂盒 HE 染色是一个对经验要求非常高的染色,实验流程中所提供的染色时间都是参考时间,要根据实验原理,结合具体情况而定。

  • 产品型号:abs9217
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2021-12-19
  • 访  问  量:33

详细介绍

品牌自营品牌供货周期现货
应用领域生物产业
产品描述
描述

苏木素-伊红(HE)染色试剂盒 苏木素染液综合了多种经典的方法配制而成。该溶液无汞,可用于免疫组化复染和 H&E 染色。

组分:

A:苏木素染液      100ml

B:伊红染液          100ml

 

使用方法
苏木素-伊红(HE)染色试剂盒实验流程:
1.需要用户自己准备的试剂
a.固定液:4%多聚甲醛/通用型组织固定液(abs9179;
b.分化液:5%的乙酸溶液或0.5%的盐酸乙醇;

c.如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,和封片剂(如中性树胶(镜检用封片剂)abs9177),及80%乙醇、90%乙醇、无水乙醇;

d.70%乙醇。
2.样品处理
a.对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡5-10分钟;
换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟;
无水乙醇5分钟;
90%乙醇2分钟;
80%乙醇2分钟;
70%乙醇2分钟;
蒸馏水2分钟。
b.对于冰冻切片:
固定液固定10分钟以上;
蒸馏水2分钟。
c.对于培养细胞:
固定液固定10分钟以上;
蒸馏水洗涤2分钟;
换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2分钟。
3.苏木素:水化后,组织切片用苏木素染色 1~3min,可根据染色结果和要求调整染色时间。 苏木素是一种基本染料,可以对细胞的酸性成分进行染色,包括核酸、粘多糖、酸性糖蛋白, 将他们染成蓝-紫色。 注意:没有苏木素,伊红会将组织染成亮粉红色;显而易见的是缺乏细胞核。组织结构很难 区分,细胞内成分几乎都不存在,难以辨别。
4.水洗:苏木素染色后,用水洗组织是非常重要的。这一步以及随后的水洗,可将多余的 染料,媒染剂等去除。适当的漂洗可以去除表面金属光泽,金属光泽可阻止苏木素的染色。 注意:跳过此步,将产生不好的结果,例如沉淀的形成,染液的稀释,表面金属光泽的存在。
5.酸酒精:酸酒精分色剂 3~5sec。在苏木素染色方法中,组织切片有意过度染色,酸酒精 将去除多余的染料以及玻片上的背景染色。 注意:如果没有此步骤,组织切片将变为暗紫色。嗜酸结构,例如,胶原,将不会呈现明亮 的粉红色。组织结构之间将很难区分。很难对切片做出正确的判断。 分色过度可能是由于: 1)酸浓度过高; 2)脱色时间过长等。 分色不足是由于: 1)酸浓度过低; 2)脱色时间不足; 3)在切片上有多余的蛋白或者明胶等。
6.水洗:水洗 30sec,终止酸酒精反应,进一步阻止酸酒精从组织切片上将大量苏木素去除。 注意:如果切片没有经过漂洗,酸酒精可以过度脱色。如果不去除脱色剂,酸酒精将持续从 组织切片上去除苏木素。
7.自来水冲洗或用蓝化液蓝化:自来水冲洗 3~5min,可起到发蓝处理,将紫红色的苏木素 转变为蓝紫色。通常,发蓝试剂是 pH 依赖性的,由碱性溶液构成。因此,如果自来水作为 发蓝试剂,pH 值的每天监控是非常重要的,因为自来水的 pH 值可能每天都会波动。 或用蓝化液蓝化,30sec~1min;流动的自来水冲洗 5min; 注意:跳过发蓝试剂步骤,将会导致苏木素染液的颜色发生微妙的变化,难以区分。代替深 蓝色,细胞核将呈现紫色,有时甚至是红色。细胞核不可过度蓝染。如果组织染色过蓝,一 般是在组织切片上苏木素过多所致。
8.水洗:为伊红复染做准备,通过水洗 30sec,将多余的发蓝试剂去除。因为在碱性环境下, 伊红无法染色,水洗去除发蓝试剂将允许伊红保持其酸性 pH 值,使伊红得以均匀复染。 注意:发蓝试剂之后,如果没有水洗,组织切片无法正确使用伊红染色。因此,酸性结构将 被染为苍白色并且不均匀,进而导致错误的判断。
9.伊红:为了正确区分胞内结构,伊红是出色的苏木素复染剂。伊红复染 30~60sec,可根 据染色结果和要求调整染色时间。伊红是酸性染料,可染细胞质,尤其是线粒体、分泌颗粒 和胶原。它可以区分细胞内不同的细胞器以及不同的结缔组织。 注意:使用伊红复染组织切片的失败,将导致组织切片的低分化。 染色较弱是由于: 1)组织切片过薄; 2)染色时间不足; 3)随后 95%酒精分化过度。 染色过度是由于: 1)染液浓度较高(可能是由于过度蒸发); 2)组织切片过厚; 3)染色时 间过长; 4)随后 95%酒精分化不足。 伊红染色未分化(一种颜色)是由于: 1)固定不彻底; 2)过度染色,a)染色时间过长;b)染液浓度过高。
10.95%乙醇:95%乙醇处理 2 s~1 min,根据染色结果和要求调整;伊红分化将产生不同的 粉色。 注意:如果 95%乙醇被稀释(例如,从前一步染色中携带了伊红),分化的效果较差。
11.100%乙醇:通过 100%乙醇使组织切片脱色。100%乙醇处理 1 min;再用新的 100%乙醇 处理 1 min。 注意:这一步很难引起注意,若无 95%乙醇,难以区分酸性结构,组织切片成为粉色。若 无 100%乙醇脱水,组织切片不能完全脱水,导致在盖片下形成水珠。这些水珠可与下一步 的二甲苯结合而形成白色混浊物,这将影响组织切片的质量。
12.二甲苯:二甲苯处理 5min。在充分脱水后,二甲苯可将组织切片上的酒精去除。去除酒 精后,在载玻片上加盖玻片时,二甲苯也可作为包埋剂确保可溶解。由于有潜在的毒性,二 甲苯替代品,例如环烷烃也可使用。替代品可提供相同的组织染色质量,并且他们 使用更安全,操作更简单。 注意:当跳过此步骤时,不使用二甲苯透明,酒精将会保存于组织切片上,导致伊红从切片 上流出。
13. 封片:中性树胶封片,自然风干或烤干,显微镜观察。
储存/保存方法
避光储存于室温,有效期12个月。
注意事项
HE 染色是一个对经验要求非常高的染色,实验流程中所提供的染色时间都是参考时间,要根据实验原理,结合具体情况而定。
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究

产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
爱必信(上海)生物科技有限公司
地址:上海市浦东新区新浩路58号申江科创园18栋
邮箱:zhouzz@absin.cn
传真:
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站