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MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

简要描述:MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒,MTT 法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。

  • 产品型号:abs50010
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2025-11-03
  • 访  问  量:1712

详细介绍

品牌absin货号abs50010
规格500T供货周期现货
主要用途用于细胞增殖和细胞毒性的检测应用领域化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药,综合

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒

产品描述
描述

        MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒可用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT可被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物甲瓒。在特定溶剂存在的情况下,可被wan全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。
        该试剂盒采用了独特的甲瓒溶解液配方,无需去除原有的培养液,可直接加入甲瓒溶解液溶解甲瓒。避免了由于去除培养液时甲瓒被部分去除而引起的误差。
        该试剂盒本底低,灵敏度高,线性范围宽,使用方便。
        试剂盒可以测定500个样品。
产品组分:

组分名称规格保存
AMTT25mg2-8℃
BMTT 溶剂5mL2-8℃
C甲瓒溶解液55mL2-8℃
使用方法
一、试剂准备:
MTT 溶液的配制:用 5mL MTT 溶剂溶解 25mg MTT,配制成 5mg/mL 的MTT 溶液。在无菌环境下,用 0.22µm 过滤后使用,或适当分装后-20°C 避光保存,保存期为半年,在2~8°C 避光保存 2 周。

二、操作流程:
1、实验所用细胞应为对数生长期细胞。检测时,应设置 MTT 溶剂对照孔(不含细胞)。
2、用分光光度计在 690nm 处测量 96 孔板的背景吸光度值。
3、通常细胞增殖实验每孔加入 100µL 2000 个细胞,细胞毒性实验每孔加入100µL 5000 个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。按照实验需要,进行培养并给予 0~10µL 特定的药物刺激。
4、每孔加入 10µL MTT 溶液,在细胞培养箱内孵育 4h。
5、孵育结束后,从培养箱中取出细胞,每孔加入 100µL 甲瓒溶解液。在细胞培养箱内继续孵育,期间可用加样枪吹打帮助溶解。直至甲瓒全部溶解。通常 37°C 孵育5~10min 左右。注:加入甲瓒溶解液后,1h 之内读板。
6、用分光光度计在 570nm 测定吸光度。所测的值减去 690nm 处测得的背景吸光度值,即为实际吸光度值。
注意事项
1、由于使用 96 孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。一方面,由于 96 孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS,水或培养液;另一方面,可以把 96 孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。
2、MTT 溶剂在低温情况下会凝固,使用前请室温放置或 20-25°C 水浴温育片刻至全部融解后使用。
3、MTT 配制成溶液后为黄色,需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时,请勿使用。MTT 溶液在 2~8°C、冰浴等较低温度情况下会凝固,可以20-25°C 水浴温育片刻至全部融解后使用。
4、甲瓒溶解液结冻或产生沉淀时可以 37°C 水浴孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。
5、细菌、支原体或其他微生物可破坏 MTT 四唑环,污染的细胞不能使用该方法进行检测。
6、加入甲瓒溶解液时,高蛋白含量的样本可能会形成沉淀。样本的蛋白浓度相当于10%胎牛血清(4mg 蛋白质/mL 样品)是可以接受。含高蛋白浓度的血清或血清产品需要稀释后检测。
7、含有酚红的培养基和盐溶液可提高的背景吸光度值,降低灵敏度。
基本信息
别名
MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit,MTT kit
储存/保存方法
2~8℃,避光保存,有效期12个月。
研究领域
研究领域
Drug DiscoveryAntibody DrugTarget Screening and IdentificationTarget Screening
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究




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