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BspQI

简要描述:BspQI属于 Type IIS 型限制酶,识别非回文序列,并在识别序列之外进行切割,常用于Golden Gate组装。经过优化的反应 Buffer使BspQI最大限度发挥功能,同时反应缓冲液包含重组白蛋白,其可增强多种酶的稳定性。

  • 产品型号:abs60337
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-03-05
  • 访  问  量:1379

详细介绍

品牌absinCAS-
分子式-纯度-
分子量-货号abs60337
规格500U供货周期现货
主要用途-应用领域化工,生物产业,综合
产品描述
描述

BspQI属于 Type IIS 型限制酶,识别非回文序列,并在识别序列之外进行切割,常用于Golden Gate组装。经过优化的反应 Buffer使BspQI最大限度发挥功能,同时反应缓冲液包含重组白蛋白,其可增强多种酶的稳定性。


识别位点:
5'...C G T C T T C (N)1↓...3'
3'...G C A G A A G (N)4↑...5'


同裂酶:
SapI, LguI, PciSI
注:同裂酶对于不同的甲基化修饰可能具有不同敏感性。

建议反应条件:
1× HN 缓冲液;
50℃温育;
参照“DNA 酶切流程"配制反应体系。


失活条件:
80℃温育 20 min


产品组成:


组分规格

BspQI (10 U/μl)

50ul

10× HN Buffffer

1ml






质量控制:
超长时间温育检测 :
最适反应温度下,将 10 U BspQI 与 1 μg λDNA 共同温育 3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,延时酶切可能出现星号活性。


酶切-连接-再酶切检测:
最适反应温度下,使用10 U BspQI消化底物,回收酶切产物。在22℃下使用适量T4 DNA Ligase (Fast)可以将酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。


DNase 残留检测:
将10 U BspQI与双链DNA底物在 37℃温育 16 h,通过 DNA电泳检测双链DNA底物无变化。

使用方法
1、DNA 酶切流程 
(1)在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系: 
ddH2Oup to 50ul
10× HN Buffffer5ul
底物 DNAa1ug
BspQI (10 U/ul)1ul
Total50ul
a. DNA 底物中应不含氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐,否则将会影响 BspQI 酶活性; 
(2)轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴; 
(3)50℃温育 15 min~1 h; 

(4)80℃温育 20 min 即可使酶失活,停止反应,或者通过吸附柱或氯仿纯化终止反应。


2、注意事项 
(1) 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的 10%,避免酶中过多的甘油引起星号活性; 

(2)限制性内切酶存储缓冲液中的添加剂 ( 例如甘油、盐 ) 与底物溶液中的污染物 ( 例如盐、EDTA 或乙醇等 ) 相同,反应体积越小,酶切反应抑制效应越强。


不同 DNA 中的酶切位点数量
λDNAΦX174pBR322pUC57pUC18/19SV40M13mp18/19Adeno2
101111007
甲基化修饰影响
DamDcmCpGEcoKIEcoBI
无影响无影响无影响无影响无影响
储存/保存方法
-20°C 及以下运输及保存,长期保存建议放 80°C 。有效期2年。
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究


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