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Human MMP-9 ELISA KIT

Human MMP-9 ELISA KIT

型    号: abs510010
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Human MMP-9 ELISA KIT;人基质金属蛋白酶9检测试剂盒

abs510010Human MMP-9 ELISA KIT的详细资料:

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人MMP-9抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体,经过孵育,样本中存在的MMP-9与固相抗体和检测抗体结合,形成免疫复合物。洗涤去除未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)。洗涤后,加入显色底物,避光显色。加入终止液终止反应,在450 nm波长(参考校正波长540nm570nm)测定吸光度值。

检测类型:双抗夹心法

形式:预包被96孔板

检测样本类型:细胞上清液,血清,血浆

上样量:100ul

试剂盒组分:

预包被96孔板、标准品、MMP-9检测抗体、稀释用缓冲液、显色液(AB)、洗涤液、终止液、SA-HRP、封板膜和说明书一份。

灵敏度:0.156ng/mL

检测范围:31.2 - 2,000 pg/mL

回收率范围:85-104%

保存方法:2-8

标准曲线图

 

背景:

基质金属蛋白酶(MMPs)也被称为matrixins,是锌钙依赖性蛋白水解酶家族成员,可分解细胞外基质(ECM),在不同的亚细胞环境中,参与多种分子的加工过程。MMPs在众多生理学进程中发挥重要功能,例如胚胎发育、形态发生、繁殖以及组织重构。也参与炎症以及自身免疫疾病,例如关节炎、癌症和心血管疾病。新合成的MMPs的量主要在转录水平被调节,已经存在的MMPs的蛋白水解活性,不仅受控于酶原的活性,也受控于内源性抑制剂对酶活性的抑制,例如α2-巨球蛋白,以及金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)。

MMP-9(也称明胶酶B92kDa IV型胶原酶、92kDa明胶酶、V型胶原酶)作为糖基化酶原被分泌出来。酶原的活化涉及到N-末端前体区域的蛋白水解去除,最终形成82kDa的活性酶。活性人MMP-9与小鼠和大鼠的MMP-9分别有72%74%的氨基酸序列同源性。除了锌结合位点,催化结构域还包含三个连续的纤连蛋白II型同源单位,可结合明胶。富含脯氨酸的铰链区将催化结构域连接到C-末端血红素样结构域。在体外实验中,酶原经4-氨基苯基乙酸乙酯(APMA)处理后,不仅能产生活性酶,还能产生活性与其相当的C-末端截短形式。MMP-9可降解ECM中的成分,尤其对变性胶原(明胶)有非常高的特异性。MMP-9也可裂解IIIIVVXI型胶原,以及弹性蛋白、巢蛋白-1 和玻连蛋白。MMP-9还可裂解多种趋化因子和生长因子(例如IL-1βCXCL8/IL-8CXCL7CXCL4CXCL1Latent TGF-β、膜结合TNF-αVEGFFGF basic),β-淀粉样蛋白、P物质、髓鞘碱性蛋白。此动作可提高或降低这些可溶性因子的生物活性,也可使它们从与ECM的联合中被释放出来。MMP-9也可通过各种各样的膜蛋白触发信号通路,或是诱导它们从细胞膜上脱落从而抑制信号通路(例如CD44E-钙黏蛋白、整合素、ICAM-1IL-2 Rα)。

MMP-9由多种正常细胞和转化细胞产生,包括中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、星形胶质细胞、纤维原细胞、破骨细胞、软骨细胞、角化细胞、内皮细胞和上皮细胞。它影响生理性和病理性的血管生成和血管重构。活化的中性粒细胞释放MMP-9前体,不结合TIMP-1,允许促血管生成的FGF-2ECM中释放出来。MMP-9TIMP-1的复合物不能诱导FGF-2的释放。中性粒细胞来源的MMP-9可加剧炎症反应,通过产生来自胶原多肽来诱导额外的中性粒细胞MMP-9的释放。MMP-9在骨形成和重构、诱导行为敏化与应答、神经元突触重构的调控、着床过程中的滋养层入侵、丝氨酸蛋白酶抑制剂α1的活化中也发挥重要作用。MMP-9介导的粘附分子的脱落对于肿瘤细胞的侵袭也有直接作用。

MMP-9的循环水平在许多炎症失调疾病中有所升高,包括管腔内血栓的形成、动脉粥样硬化、克罗恩氏病、丙型肝炎病毒感染、结肠直肠癌以及杜氏肌营养不良。MMP-9TIMP-1的比例在多发性硬化症血清和囊性纤维化痰中升高,但在巨细胞病毒感染的血清中降低。游离MMP-9的水平、MMP-9与脂质运载蛋白-2/NGAL复合物的水平分别在卵巢癌患者、子宫尿道感染患者的尿液中升高。


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