荧光探针是潜在的荧光团,可根据生物微环境变化、与被分析物相互作用或特定化学反应显示荧光信号。由于其具有操作简单、选择性好、灵敏度高、检测范围广、响应速度快以及对样品损伤小等优点,已经被成功应用于生物医学、生命科学及环境科学等领域。钙离子荧光探针:钙(Calcium)是一种重要的且普遍存在的第二信使,参与调控各种各样的细胞过程,包括细胞增殖、基因转录、肌肉收缩和胞吞作用。响应于大量的刺激物,钙离子(Ca2+)从胞内的储存池释放出来,而胞内Ca2+浓度的增加会引起细胞功能的活化、...
PCR技术的前世今生科学家对核酸的研究已有100多年历史,20世纪70年代初人们就致力于研究基因的分离技术。Khorana等于1971年最早提出核酸体外扩增理念:DNA变性解链后与相应引物杂交,用DNA聚合酶延伸,重复该过程便可以克隆基因[1]。因为当时的技术尚未成熟,该设想一直未被证实。直到在1985年,Mullis等用大肠杆菌DNA聚合酶体外扩增哺乳动物单拷贝基因成功(发明人KaryBanksMulis也因此荣获了后期的诺贝尔化学奖)。1988年Saiki等将耐热DNA聚...
近年来,生物大分子标记技术受到很大重视并取得了迅速进展,此技术广泛应用于细胞内外物质的检测、核酸杂交测序以及疾病诊断等诸多方面。抗体/蛋白的标记原理是标记试剂与抗体/蛋白所带的巯基、氨基及羧基等基团发生置换或缩合反应连接在一起。抗体标记技术被广泛用于医学病理学、免疫组织化学、分子生物学等领域。本期小爱主要介绍3种常见的抗体标记技术:荧光素(FITC、PE、APC等)标记法、酶(辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)标记法和生物素(Biotin)标记法。抗体/蛋白的异硫氰酸荧光素(FI...
科研狗起早摸黑做了几天分子克隆实验,本想着拖了好几个星期的实验终于要做完啦!瞬间觉得自己棒棒哒!但是最后看实验结果!!!原地裂开排查实验试剂,没问题!排查实验操作,没问题!排查仪器,没问题!那么问题到底出在哪呢?其实问题有可能出现在样本保存与前处理步骤中哦。生物样本中的核酸(DNA/RNA)会因为核酸酶、温度、pH值、微生物、自身化学性质等因素而发生被动或主动降解,从而导致分子实验结果不尽人意。目前针对不同科研的需求,更多的样本保存方式也相继问世,小爱为大家汇总了各类样本保存...
自噬的研究背景关于自噬的研究曾获得过两次诺贝尔生理学或医学奖。是比利时科学家克里斯汀·德·迪夫(ChristiandeDuve)因发现了在细胞自噬机制中起到重要作用的溶酶体,获得1974年诺贝尔奖;其次是日本大隅良典团队因探明了细胞自噬的启动机制,获得2016年诺贝尔奖。2023年,国家自然科学基金委员会揭晓的今年国自然评审结果,自噬相关研究的中标数量超500项(来源:ZCOOL国自然项目查询系统)!图1自噬研究进程什么是自噬?自噬是细胞在相关基因(autophagyrela...
FTO(fatmassandobesity-associatedprotein)蛋白是一个m6A修饰去甲基化酶,位于细胞核内,其主要功能是通过氧化脱甲基酶活性降低m6A水平,FTO针对单链RNA中的m6A发挥去甲基化活性。目前已有各项研究表明m6A修饰参与了溃疡性结肠炎的发病机制。2023年9月21日,上海交通大学医学院附属仁济医院洪洁、陈豪燕团队与附属瑞金医院刘瑞欣团队在杂志GUT上联合发表题为DisruptionofCerS6-MediatedSphingolipidMe...
概念——Mckay于1997年在《Science》杂志上将神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)的概念总结为:具有分化为神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞的能力,能自我更新并足以提供大量脑组织细胞的细胞,神经干细胞的发现打破了神经细胞不能再生的传统理论。图1第3、5、7代神经球巢蛋白免疫荧光染色(×400)免疫荧光染色阳性图片特点——通过对称分裂和不对称分裂两种分裂方式完成自我更新,NSCs具有多向分化潜能,且不表达成熟抗原,不被免疫系统所识别,能通过血脑屏障...
猴痘(Monkeypox,MPX)是由猴痘病毒(Monkeypoxvirus,MPXV)引起的一种病毒性人畜共患病,其属于正痘类病毒,症状表现类似于天花,常见症状表现为发烧(通常在38.5℃到40.5℃之间)、头痛、肌肉酸痛、淋巴结肿大及皮疹等[1]。自1970年报告了第一例患者以来,猴痘主要在非洲地区流行。但2022年5月,猴痘开始了全球范围的大流行,已有113个国家(地区)报告了89000多例猴痘确诊病例,包含152例死亡病例。2023年6月,我国多个省份先后报告多例猴痘...