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  • 问题一:高背景可能的原因解决方法去污剂不溶性蛋白有残留离心后立即去除上清,沉淀中留有不溶性蛋白质,如果再次有悬浮发生,再次离心洗涤不充分盖上管盖离心前反复颠倒几次非特异性蛋白质与珠子结合珠子用BSA预封闭不充分,确保牛血清白蛋白(组分V)新鲜,新鲜珠子与含1%牛血清白蛋白的PBS孵育1小时,使用前PBS洗3-4次使用的抗体特异性不强使用亲和纯化的抗体,预先吸收使用太多抗体导致非特异性结合检查推荐抗体用量。尝试使用更少的抗体细胞裂解液中含有太多的细胞或太多蛋白,导致洗脱液中很多...

    2018-03-22
  • 问题一:转膜不充分可能的原因验证或解决方法膜没有*均匀湿透使用100%甲醇浸透膜靶蛋白分子量小于10kDa选择小孔径的膜,缩短转移时间靶蛋白等电点等于或接近转移缓冲液PH值可尝试使用其他缓冲液如CAPS缓冲液(pH10.5)或使用低pH值缓冲液如乙酸缓冲液甲醇浓度过高过高甲醇浓度浓度会导致蛋白质与SDS分离,从而沉淀在凝胶中,同时会使凝胶收缩或变硬,从而抑制高分子量蛋白的转移。降低甲醇浓度或者使用乙醇或异丙醇代替转移时间不够对于厚的胶以及高分子量蛋白需要延长转移时间问题二:背...

    2018-03-20
  • 注意事项★一定要使用我们盒内配套的电泳缓冲液;★上样量和浓度不能过高。1.我们的预制胶与哪些品牌电泳槽兼容?●Bio-RadMini-PROTEAN(II/3/TetraSystem);●HoeferMightySmall(SE250/SE260/SE280);●LifeTechnology(Invitrogen);●NovexMini-Cell;●MiniGelTank(A25977)(请与EZbiolab特制挡板配合使用);●北京六一DYCZ-25E;●君意东方JY-SC...

    2018-03-15
  • WesternBlot(WB)即蛋白免疫印迹实验,是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小讲蛋白分离,再通过电场力将蛋白转移到杂交膜上。然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。WB是进行蛋白质分析zui流行和成熟的技术之一。在WB过程中,分子量Marker就像个螺丝钉一样,只是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个WB参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小,只有标准量无误了,实验结果才有说服力,除此之外,蛋白标...

    2018-03-13
  • 鸡胚提取物它的K、Fe、Se矿物元素和维生素A、D、B2等含量也很高。这使得它不但具有补充这些营养素的作用,而且,还可能有一些保健功能。本试验用低硒饲料喂饲的小鼠4周后,各剂量组和低硒对照组动物全血GPX活性抑制率30%,试验至8周末,低硒组血硒降低,全血GPX活性抑制率仍30%。说明硒营养不良动物模型建立成功。而且,低硒组动物的血硒、GPX活性保持在较低水平,显示硒营养不良动物模型稳定。小鼠的脑、肝硒含量均降低(P0.05),脑、肾、肝GPX也显着性降低(P0.05),而全...

    2018-03-12
  • 免疫学三大工具,IHC、Westernblot、ELISA,分别用于定位,定性和定量!IHC(免疫组化)是融合了免疫学原理(抗原抗体特异性结合)和组织学技术(组织的取材、固定、包埋、切片、脱蜡、水化等),通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色,来对组织(细胞)内抗原进行定位、定性及定量的研究(主要是定位)。样本是细胞或组织,要在显微镜下观察结果,可能出现膜阳性、质阳性和核阳性。ELISA(酶联免疫吸附试验)用到了免疫学原理和化学反应显色,待测的样品...

    2018-03-09
  • 使用牛垂体提取物工作人员应当首先注意自身安全,必须穿戴齐实验衣和实验手套后才能进行实验.对于病毒感染或是来自人类的细胞株应当特别小心操作,并选择适当等级的无菌操作台进行(至少是ClassII)操作过程中,应避免引起aerosol的产生,小心有毒性药品,例如DMSO和TPA等,并避免针头的伤害等等。定期检测下列项目,CO2钢瓶的CO2压力,CO2培养箱的CO2浓度、温度、和水盘是否有污染(水盘的水需用无菌水,每周定时更换)。无菌操作台内的airflow压力,定期更换紫外线灯管和...

    2018-03-07
  • 血清小知识血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,而且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出...

    2018-03-07
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