还在为选择经济实惠的MTT还是常用的CCK-8烦恼？MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。与MTT相比较，cck-8法优势明显。在一定细胞数范围内，cck-8检测OD值与活细胞数的线性关系比MTT法明显。而且，MTT法产生不溶于水的蓝紫色结晶，需要有机溶剂DMSO溶...

Westernblot底物发光检测试剂可由标记于二抗上的辣根过氧化酶催化，产生化学发光反应，可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。AbsinECL底物化学发光检测试剂盒基于新一代增强型化学发光底物研制而成，由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应，发出荧光，可对X光胶片曝光，也可直接进行luminometer检测或者荧光CCD扫描。产品背景更低，稳定性更好。试剂盒组分：A液；B液操作步骤：1.按常规Westernblot操作，二抗孵育后，进行后一次洗涤时，根据膜的大小，按每10c...

PMA(TPA)佛波酯是一种广泛用于体内外实验的佛波酯(phorbolester)PKC激活剂。PMA结合PKC(Ki=2.6nM)并激活其功能，在细胞和组织中都呈现出极其广的抑制谱。PMA可以抑制Fas诱导的细胞凋亡，但又可以诱导HL-60细胞的凋亡。PMA是一种高效的肿瘤促进剂，可以促进小鼠皮肤瘤的形成。尽管PMA毒性较强，但是在人体内仍显示出抗白血病和抗中性白细胞减少的活性。图一.PMA结构图体外研究：为了检查PKC在p38MAPK磷酸化中的作用，用PKC活化剂PMA（...

一、免疫共沉淀实验免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation,Co-IP），是以（抗体和抗原）之间的专一性作用为基础的用于研究（蛋白质相互作用）的经典方法。是确定两种蛋白质在完整（细胞内生理性）相互作用的有效方法。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。区别于IP实验，CO-IP与IP只取决于检测焦点是初级靶分子（抗原）还是次级靶分子（相互作用蛋白）二、实验过程1、提取蛋白。2、在细胞裂解液中加入抗X的抗体。3、孵育后再加入Pr...

ELISA试剂盒变质是ELISA实验中比较常见的问题，那么，ELISA试剂盒变质是因为什么呢？是什么影响了ELISA试剂盒质保？一旦变质会有什么影响呢？一、方法学的影响ELISA测定模式包括以下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞争抑制法，其中竞争抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作时差所引起的不gong平竞争等因素的影响，结果重复性较差，质量较难控制。二、试剂因素不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量*一致，即使是通过批批检的项...

Elisa实验中应该注意的问题,包括样品稀释、试剂盒平衡、样品和试剂的混匀、加样、温育等问题.Elisa试剂盒有着准确性高、灵敏度高、特异性强的诸多优点,深受广大用户朋友的喜爱.然而,在实验过程中,也需要注意很多问题.Elisa方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定.在Elisa测定中影响因素较多,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果.引起ELISA测定错误结果的原因主要有：标本因素；试剂因素；操作因素.1．样品稀释一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试...

【DNA甲基化】DNA甲基化是指在DNA甲基转移酶（MTase）催化下，在DNA腺嘌呤或胞嘧啶碱基上加一个甲基，是细菌复制后DNA修饰机制中研究多的一种。迄今为止发现的三种核苷酸甲基化形式是：N6甲基腺嘌呤（m6A）、N4甲基胞嘧啶（m4C）和5-甲基胞嘧啶（m5C）。DNA甲基化是一种表观遗传修饰，抑制基因表达。DNA甲基化主要由DNA甲基转移酶家族（DNMTs）引起，包括DNMT1、DNMT3a和DNMT3b。传统上，DNMT1作为主要的维持甲基转移酶来保持基因组中已建立...

细胞培养/凋亡时，需要对其生长和活性情况进行观察。由于细胞小而透明常采用细胞染色的方法观察！今天小编整理了下常用染色方法，供大家参考！Hoechst染色：Hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合(主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染色为蓝色。IP(碘化丙啶)染色：是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测。碘化丙啶是一种核酸染料呈红色，它不能透过完整的细胞膜，但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞通透性的增加，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红，用PI单一染色观测培...