聚合酶链反应(PCR，PolymeraseChainReaction)由KaryMullis博士于20世纪80年代开发。该技术因其识别特定DNA序列并快速准确地合成大量副本的能力而被比作“分子复印机”。目前开发了各种基于原始PCR方法的衍生技术。实时PCR，也称为定量PCR(qPCR)，将PCR放大和检测结合在一步中。另一种称为逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的技术使用RNA作为核酸起始模板。●PCR：包含DNA模板、DNA聚合酶、引物和dNTPs的反应混合物的重复加热和冷...

1、目的蛋白以其他形式存在，最常见的情况●翻译后修饰：如糖基化，常见接受糖基化的氨基酸是丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、天冬酰胺(Asn)和羟赖氨酸(Hydroxylysine)，例如CD2，根据uniprot显示，其预测分子量应该在39kda左右，但是表观分子量一般在45kDa左右，这是由于CD2多个位点存在糖基化修饰，实际实验中，如果想探究分子量差异是否是由糖基化引起的，可以加入糖苷酶PNGaseF切去糖基后，进行WB，而除了糖基化以外，还存在磷酸化，泛素化、甲基化、...

流程类器官原代培养流程原代一、准备工作1、仪器设备CO2培养箱、双人单面超净台、倒置显微镜、台式冷冻离心机、水浴锅(abs72023)或水浴摇床，医用冰箱、-80℃冰箱、移液器（一套）、眼科剪、眼科镊2、试剂耗材（以肠癌为例）动物脑类器官培养基试剂盒(abs90050)，基质胶（低因子、无酚红）(abs9495)，60mm细胞培养皿(abs7005)，100μm滤筛(abs7009)，15mL离心管(abs7102)，1.5mLEP管若干(abs7119)，24孔细胞培养板(...

在分子生物学和遗传学的研究中，荧光原位杂交(FluorescenceInSituHybridization,FISH)技术是一项革命性的进展。它不仅为我们提供了一种强大的工具来研究基因的结构和功能，还帮助我们深入理解染色体异常与疾病之间的关系。本文将带您穿越时间的长河，探索FISH技术的起源，以及它是如何发展成为现代分子生物学中重要的一部分。一、原位杂交技术的诞生原位杂交(InSituHybridization,ISH)技术的概念最早可以追溯到20世纪60年代。1969年，科...

一、实验准备TILs提取培养试剂盒（abs90045）产品组成规格储存条件及周期1TIL细胞扩增培养基A100mL4℃,3months或者-20℃,1年2TIL细胞激活培养基B30mL4/-20℃,2年3组织消化液C50mL4/-20℃,1年4分离液D20mL常温5分离液E40mL常温6细胞滤筛100μm常温7组织缓冲液F2x250mL4/-20℃,2年8组织保存液G5x8mL4/-20℃,1年9冻存液H30mL4/-20℃,1年需要额外准备的试剂及耗材货号品名规格储存条件及...

CRISPR/Cas系统是细菌获得性免疫的重要组成部分，由Cas核酸酶和两种单独的RNA成分组成，即可编程crRNA（CRISPRRNA）和固定的TracRNA（反式激活crRNA）。2012年，JenniferDoudna和EmmanuelleCharpentier发现Cas9可以当作DNA切割工具，CRISPR/Cas9技术才真正开始受到广泛关注。CRISPR/Cas9调控机制1、CRISPR的转录：CRISPR被转录成一条长RNA(pre-crRNA)，包含了重复序列和...

小鼠脾脏是一个重要的免疫器官，位于小鼠左侧腹腔中，靠近胃的左侧，呈长椭圆形状。大小会根据小鼠的品种和健康状况有所不同，一般来说，成年小鼠的脾脏长度大约在1.5厘米到2.5厘米之间。脾脏的颜色和质地可能会因为小鼠的品种和健康状况而有所变化，通常呈现出类似叶片的形态，颜色暗红。在实验研究中，小鼠脾脏细胞的分离、培养和计数是免疫学研究的重要方法，也是流式细胞术分析的前提。一、耗材与试剂表1小鼠脾脏解离部分试剂耗材参考表材料试剂设备15/50mL离心管1xPBS缓冲液水平恒温摇床10...

外泌体作为细胞间通讯的重要载体，在生物医学研究中扮演着至关重要的角色。近年来，随着外泌体研究的不断深入，外泌体提取与纯化试剂盒的优化与创新也日益受到关注。传统的外泌体提取方法，如超速离心法、密度梯度离心法等，虽然在一定程度上能够实现外泌体的提取，但操作繁琐、耗时较长，且提取效率和纯度有限。为了克服这些缺点，研究人员不断探索新的提取方法和材料，以优化外泌体提取试剂盒的性能。其中，一些试剂盒采用了多聚物沉淀法，通过减少离心管、移液枪头等耗材材料表面的亲水性或疏水性等基团、表面电荷...