非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)或称为活性电泳是在不加入SDS和巯基乙醇等变性剂的条件下,对保持活性的蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于酶的鉴定、同工酶分析和提纯。与非变性凝胶电泳最大的区别就在于蛋白在电泳过程中和电泳后都不会变性,保证了蛋白质功能。为什么SDS-PAGE需要对蛋白进行变性处理?在天然状态下,蛋白以折叠的形式存在,且在同一分子内同时具有正电荷和负电荷,电荷和折叠方式的不同,使具有相同分子量的不同蛋白质在凝胶上以不同的速度迁移,这让聚丙烯酰胺...
在这个充满未知的科研世界里,每一次实验都是对知识的探索,每一个数据都是对真理的追求。爱必信实验室桌面小仪器,专为追求精确和效率的您设计。一、离心机系列1、复合转子离心机复合转子离心机采用“三合一”复合转子设计。适用于:6x1.5/2.0mL离心管、6x0.5mL离心管、2x8x0.2mLP-CR排管、16x0.2mL离心管。用户不需要更换转子即可离心多种规格的离心管,方便使用、节省时间。转速4000rpm、6000rpm、7000rpm三档可调、定时功能满足不同实验需求。翻盖...
在之前的文章中,小爱为大家介绍了IHC的原理以及样本处理的实验要点:答应我,看完再做IHC(上)今天我们继续看看接下来的实验流程及操作要点。首先还是先来回顾一下IHC的整体流程:前期样品处理的过程包括载玻片的制备,脱蜡/复水,抗原修复(上期内容),然后我们需要做样品的封闭,孵育一抗和二抗,以及底物检测,最后的处理步骤包括脱水,封片和观察。PART1我们介绍了样品制备环节,今天我们继续看下PART2抗体孵育及检测。PART2抗体孵育及检测(1)淬灭:如果使用基于酶或者生物素的检...
重组蛋白是指利用DNA重组技术或重组RNA技术从而获得并生产的蛋白质。具体操作流程可以概括为利用中心法则采用基因重组分子克隆技术,获得可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。重组蛋白获得的途径分为体内和体外生产,表达系统主要分为原核表达系统和真核表达系统。原核表达系统最常见的是利用大肠杆菌进行表达,真核表达系统主要为酵母蛋白表达、哺乳动物细胞蛋白表达(常用的细胞为CHO细胞、HEK293细胞)、昆虫细胞蛋白表达...
概述肿瘤微环境(tumormicroenvironment,tme)是由肿瘤相关基质细胞、免疫细胞,以及相应细胞的分泌产物(如细胞因子和趋化因子)和细胞外基质(ecm)中的非细胞成分组成的。肿瘤微环境为肿瘤提供了良好的生长环境和营养物质,促进肿瘤的进展和转移,这也是临床中导致许多个体患者常规治疗失败的原因。肿瘤类器官相对于pdx动物模型,体外培养环境相对单纯,而缺乏肿瘤微环境的类器官模型,又很难wan全模拟肿瘤对于药物的反应性,特别是免疫细胞随着肿瘤类器官的培养,会逐渐功能下...
蛋白酶K,也称为肽酶K或者精氨酸蛋白酶K,是一种重要的蛋白水解酶,广泛存在于生物体内,在细胞代谢、信号转导、蛋白质降解等生物学过程中发挥着关键作用。本文将介绍蛋白酶K的功能、结构以及其在生物科学和医学领域中的应用。蛋白酶K主要功能于泛素-蛋白酶体系统中,参与调控细胞内蛋白质的降解和循环利用。其作用是通过降解不再需要的蛋白质或者异常蛋白质,从而维持细胞内的蛋白质平衡。蛋白酶K能够识别并切割具有特定氨基酸序列的泛素化蛋白,将其降解成短肽或者氨基酸,为细胞再利用提供原料。此外,蛋白...
一、抗体偶联药物ADC介绍抗体偶联药物(Antibody-DrugConjugate,ADC),是一种通过连接子将抗体与具有生物活性的小分子细胞毒性载荷连接起来的新型高效生物药物(图1)。ADC药物的三大元件包括:1)特异性靶向抗体;2)毒素;3)可裂解/不可裂解的连接子。异性靶点识别及有效的毒素作用使ADC成为名副其实的“生物导dan”。ADC药物的开发具有较高的技术壁垒,需要综合考虑靶点的合理选择;抗体、连接子、小分子药物及它们之间的合理组合;抗体偶联技术以及ADC药物的...
IHC实验是科研人bi备的实验技能之一,然而IHC实验流程复杂,而且经常出现假阴性的结果,常常让人头疼。为此特别给大家整理了一份IHC实验详解,原理,步骤,注意事项及操作视频一网打尽,想做IHC实验只看这篇就够了(分为上下两篇哦)。IHC实验原理免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC):利用抗原-抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂显色以确定细胞内抗原,并对其进行定位、定性及定量的研究。和WB实验相比,IHC实验可以更为直观的展现待测蛋...
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