在生物医学实验的微观世界里,每一个细微的操作都可能对实验结果产生重大影响。组化笔,作为一种看似小巧却有着关键作用的工具,在免疫组化、原位杂交等实验中扮演着重要的角色,宛如一根精准的“魔法棒”,助力科研人员探索生命的奥秘。组化笔的主要功能是在载玻片上勾勒出一个疏水的边界,从而将实验样本限定在特定区域内。其原理基于特殊的高分子材料,当组化笔在玻片上书写后,留下的痕迹能够形成一层具有疏水性的薄膜。这层薄膜就像一道无形的堤坝,阻止液体在玻片上随意扩散,使得后续添加的抗体、探针等试剂能...
CD44与CD62L系T细胞表面的两类分子标识,于T细胞活化、迁移及功能的调控进程中占据关键地位。今天小爱带您来看看这两个指标对肿瘤细胞和T细胞种的标记作用。CD44是一种跨膜糖蛋白,属于整合素家族。它广泛表达于多种细胞类型,包括白细胞、内皮细胞、成纤维细胞和某些肿瘤细胞。细胞黏附和迁移:CD44通过与透明质酸(HA)结合,参与细胞的黏附、迁移和信号传导。在免疫细胞中,CD44有助于T细胞和B细胞在淋巴组织中的定位和迁移。肿瘤生物学:CD44是肿瘤干细胞的标志物之一,参与肿瘤...
聚合酶链反应(PCR,PolymeraseChainReaction)由KaryMullis博士于20世纪80年代开发。该技术因其识别特定DNA序列并快速准确地合成大量副本的能力而被比作“分子复印机”。目前开发了各种基于原始PCR方法的衍生技术。实时PCR,也称为定量PCR(qPCR),将PCR放大和检测结合在一步中。另一种称为逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的技术使用RNA作为核酸起始模板。●PCR:包含DNA模板、DNA聚合酶、引物和dNTPs的反应混合物的重复加热和冷...
1、目的蛋白以其他形式存在,最常见的情况●翻译后修饰:如糖基化,常见接受糖基化的氨基酸是丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、天冬酰胺(Asn)和羟赖氨酸(Hydroxylysine),例如CD2,根据uniprot显示,其预测分子量应该在39kda左右,但是表观分子量一般在45kDa左右,这是由于CD2多个位点存在糖基化修饰,实际实验中,如果想探究分子量差异是否是由糖基化引起的,可以加入糖苷酶PNGaseF切去糖基后,进行WB,而除了糖基化以外,还存在磷酸化,泛素化、甲基化、...
流程类器官原代培养流程原代一、准备工作1、仪器设备CO2培养箱、双人单面超净台、倒置显微镜、台式冷冻离心机、水浴锅(abs72023)或水浴摇床,医用冰箱、-80℃冰箱、移液器(一套)、眼科剪、眼科镊2、试剂耗材(以肠癌为例)动物脑类器官培养基试剂盒(abs90050),基质胶(低因子、无酚红)(abs9495),60mm细胞培养皿(abs7005),100μm滤筛(abs7009),15mL离心管(abs7102),1.5mLEP管若干(abs7119),24孔细胞培养板(...
在分子生物学和遗传学的研究中,荧光原位杂交(FluorescenceInSituHybridization,FISH)技术是一项革命性的进展。它不仅为我们提供了一种强大的工具来研究基因的结构和功能,还帮助我们深入理解染色体异常与疾病之间的关系。本文将带您穿越时间的长河,探索FISH技术的起源,以及它是如何发展成为现代分子生物学中重要的一部分。一、原位杂交技术的诞生原位杂交(InSituHybridization,ISH)技术的概念最早可以追溯到20世纪60年代。1969年,科...
一、实验准备TILs提取培养试剂盒(abs90045)产品组成规格储存条件及周期1TIL细胞扩增培养基A100mL4℃,3months或者-20℃,1年2TIL细胞激活培养基B30mL4/-20℃,2年3组织消化液C50mL4/-20℃,1年4分离液D20mL常温5分离液E40mL常温6细胞滤筛100μm常温7组织缓冲液F2x250mL4/-20℃,2年8组织保存液G5x8mL4/-20℃,1年9冻存液H30mL4/-20℃,1年需要额外准备的试剂及耗材货号品名规格储存条件及...
CRISPR/Cas系统是细菌获得性免疫的重要组成部分,由Cas核酸酶和两种单独的RNA成分组成,即可编程crRNA(CRISPRRNA)和固定的TracRNA(反式激活crRNA)。2012年,JenniferDoudna和EmmanuelleCharpentier发现Cas9可以当作DNA切割工具,CRISPR/Cas9技术才真正开始受到广泛关注。CRISPR/Cas9调控机制1、CRISPR的转录:CRISPR被转录成一条长RNA(pre-crRNA),包含了重复序列和...
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