它们的概念分别是什么?PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR这四种技术都是基于聚合酶链式反应(PCR)的技术,但是它们之间存在一些区别。PCR:聚合酶链式反应(PCR)是一种体外扩增DNA分子的技术,利用DNA聚合酶和多个引物在所需温度下扩增目标DNA分子。PCR反应分为三个阶段:预变性、变性-退火-延伸和延伸。PCR技术主要用于DNA序列的扩增和检测,应用广泛,如基因克隆、DNA序列测定等。qPCR:实时定量聚合酶链式反应(qPCR)是一种实时检测PCR过程中荧光信...
在生物学实验中,二抗的选择至关重要。其中,HRP酶标二抗和荧光二抗是两种常见的二抗类型,它们各具特色,并在不同的实验场景下发挥着关键作用。一、HRP酶标二抗1.定义及特性HRP酶标二抗,即辣根过氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP)标记的二抗,是生物学实验常规用的二抗。其特点包括比活性高、稳定性好、分子量小、纯酶容易制备等,因此在免疫学实验中广泛应用。2.应用场景HRP酶标二抗常用于如免疫印迹(WB)、酶联免疫吸附试验(ELISA)以及免疫组织化学(I...
细胞是生命的基本单位,是生物学研究中非常有用的工具。细胞培养的过程就是人工模拟细胞体内生长环境,置于无菌、适宜温度及酸碱度的环境中,保证充足的营养使其不断生长繁殖,并维持其结构和功能。作为基础又常规的实验技能,自然颇受关注。后续会创建《常见细胞培养攻略》系列,会为大家介绍一些常见细胞的培养方案,包括但不限于T细胞、B细胞、NK细胞、巨噬细胞、干细胞培养等。今天主要是细胞培养入门指南的相关内容,其他的内容大家可以持续关注追更。1.细胞类型1)原代细胞(primarycell):...
在当今生物医学研究领域,多重荧光免疫组化(mIHC)技术正变得越来越重要。这项技术能够在单一组织切片上同时检测多种蛋白质,为我们提供了一个强大的工具,以揭示细胞和组织内部复杂的生物学信息。随着多重荧光免疫组化技术的不断发展,越来越多老师希望在自己的片子上看到更丰富的靶标信息,意味着我们需要用到更多种荧光染料去完成染色,但由于荧光染料产生的信号不是单纯的线性,而是呈现山峰状的分布,在最高点信号固然最好,但在最高点左右的一段范围内都能够捕获到它的信号,那么相邻的染料之间,难免会有...
流程类器官原代培养流程准备工作1、仪器设备CO2培养箱、双人单面超净台、倒置显微镜、台式冷冻离心机、水浴锅(abs72023)或水浴摇床,医用冰箱、-80℃冰箱、移液器(一套)、眼科剪刀、眼科镊。2、试剂耗材货号品名规格储存条件abs9932人正常皮肤类器官培养基100mL2-8℃,3个月abs9931类器官人正常皮肤原代组织消化液10mL-20℃,避免反复冻融,6个月;2-8℃,避光保存,6个月abs9751PBS-BSA润洗液100mL-20℃,有效期12个月abs973...
HEK293细胞系家族历史概览1973年科学家从一个父母谱系不祥的人类流产胚胎的肾脏中分离出最原始的人胚肾细胞,即293细胞(humanembryonickidney(HEK)293cellline),该细胞被转入修改后的5型腺病毒DNA片段,一开始转化非常困难,一直到几个月后,科学家得到一个稳定的可以快速生长的293单克隆细胞株,自此HEK293诞生。HEK293细胞在细胞生物学和生物技术中的应用频率仅次于第一个人类细胞系HeLa,并衍生出数百种克隆细胞系。SV40larg...
细胞消化液是细胞培养与实验中的关键工具,其原理主要通过酶解作用破坏细胞间的连接,使细胞从组织或培养基质上分离成单个细胞,以便进行后续实验。常用的细胞消化液包括胰蛋白酶、EDTA和胶原酶等,它们能够特异性地水解细胞表面的蛋白质,包括细胞外基质中的胶原蛋白、纤维连接蛋白等,从而改变细胞间的连接状态。配方方面,细胞消化液的配制需根据实验需求精确称取适量的酶粉,并加入适当的缓冲液(如D-Hanks液)中,调节pH值至适宜范围(通常为7.2-7.4),以确保酶的最佳活性。同时,还需注意...
概述免疫细胞培养的六个基本流程:样本制备、细胞分选、分型鉴定、扩增&培养、质量优化、后续研究。小爱已经给大家详细介绍了《免疫细胞培养攻略之样本制备(一)》和《免疫细胞培养攻略之细胞分选(二)》,《免疫细胞培养攻略之分型鉴定(三)》今天我们继续一起学习扩增&培养的相关知识。从样本制备到细胞分选、分型鉴定,我们终于获得了纯度高、活性好的目的细胞之后,便需要在体外人工模拟其在体内的生长环境,同时保证无菌、适宜的温度和pH,给予免疫细胞充足的营养使其不断生长繁殖,这个过程便是扩增&培...
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