概述免疫细胞培养的六个基本流程：样本制备、细胞分选、分型鉴定、扩增&培养、质量优化、后续研究。小爱已经给大家详细介绍了《免疫细胞培养攻略之样本制备（一）》、《免疫细胞培养攻略之细胞分选（二）》、《免疫细胞培养攻略之分型鉴定（三）》、《免疫细胞培养攻略之扩增&培养（四）》今天我们继续一起学习质量优化的相关知识。质量优化(QualityOptimization)：针对一些不良因素，如样本制备成单细胞悬液时产生的细胞团块、碎片等；细胞扩增培养时支原体和内毒素的影响，并积极采取对应的...

活性氧（ROS）是细胞代谢的副产物，包括超氧阴离子自由基、过氧化氢、羟基自由基等。它们在细胞信号传导中起作用，但过量产生会导致细胞损伤，并与多种疾病有关。目前针对ROS的检测方法包括荧光染色法、化学发光法、电子顺磁共振技术（EPR/ESR）、电化学生物传感器、色谱法、分光光度法和基于荧光蛋白的方法（表1）。表1常用ROS的检测方法ROS检测方法方法描述荧光染色法使用特定的荧光探针如DCFH-DA，可以检测多种ROS，探针本身无荧光，进入细胞后被酯酶水解生成DCFH，随后被RO...

什么是膜蛋白？膜蛋白是细胞膜的重要组成部分，负责许多关键的生物学功能如物质运输、信号转导和细胞间识别等，人类基因组中编码的膜蛋白约占总蛋白质组的25%左右。它们可以根据其与膜的结合方式和功能特点被分为不同的类别。以下是膜蛋白的一些主要类型和功能：1、膜蛋白分类外在膜蛋白：这些蛋白分布在细胞膜的内外表面，约占膜蛋白的20%-30%，主要在内表面。它们通过离子键、氢键与膜脂分子的极性头部相结合，或通过与内在蛋白的相互作用，间接与膜结合，大多是亲水性蛋白，主要的类型有酶类、受体蛋白...

在当今生物医学研究领域，精准、高效地识别和追踪目标分子是解锁疾病机制、开发新型药物以及推动个性化医疗的关键。抗体/蛋白标记技术作为一种强大的工具，在这一过程中发挥着不可替代的作用。通过将特定的化学标签（如荧光染料、酶或放射性同位素）与抗体或蛋白质共价结合，研究人员能够以更高的灵敏度和特异性对复杂生物系统中的目标分子进行可视化和定量分析。常见抗体/蛋白标记技术荧光素标记：使用荧光素如AlexaFluor系列（AF488\AF594\AF647等）、Cy系列（Cy3\Cy5\Cy...

小伙伴们在上篇学习了ELISA实验的原理、类型，并且根据自己的需求选择了适合自己的试剂盒，那接下来就是ELISA的实操了，包括哪些实验步骤和注意事项呢？快来和小爱一探究竟吧！ELISA实验步骤图1ELISA标准实验流程1、样本采集：a）血浆：采集血浆时可使用EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝血剂。采集后30min内，1000xg离心15min。立即检测或分装后于≤-20℃储存。避免反复冻融。b）细胞培养上清液：通过离心去除颗粒，立即检测或分装后将样品于≤-20°C储存。避免反复...

作为常见实验技能之一的ELISA已经成功逼疯了一大批研究生：加样加到手抽筋，拍板拍到人发疯。为此，小爱呕心沥血写了一份ELISA实验详解，原理、步骤、注意事项一网打尽，帮助各位小伙伴快速入门并精通ELISA（分为上下两篇噢）。ELISA实验原理酶联免疫吸附试验(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay，简称ELISA)，是一种利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法，是免疫学经典实验方法。ELISA可适用多种样本类型，主要包括血清、血浆、细...

提到细胞凋亡，想必大家都不陌生，咱们这个领域的，先不说本科的时候学过，考研的时候怎么说它也是重要考点之一。或许此时您的脑袋瓜子里立马浮现出课本上那个经典的凋亡信号通路图......额，还有点记不清......没关系，今天小编带您回顾一下经典的细胞凋亡信号通路，再看看它常见的检测方法。☆细胞凋亡1）细胞凋亡是一种细胞主动有序的死亡，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等作用，它并不是病理条件下自体损伤的一种现象，而是为了更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡。2）细胞凋亡相关信...

什么是TR-FRET？TR-FRET（Time-ResolvedFluorescenceResonanceEnergyTransfer，时间分辨荧光共振能量转移）是一种用于研究分子间相互作用的生物物理技术。它结合了两种技术：荧光共振能量转移(FRET)和时间分辨荧光(TRF，Time-ResolvedFluorescence)。荧光共振能量转移原理图荧光共振能量转移(FRET)是一种物理现象，其中一个荧光分子（供体）在吸收光能后，可以将激发能量非放射性地传递给另一个分子（受体...