产品分类
Product Category详细介绍
| 品牌 | absin | 货号 | abs90779 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 10mg | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 既可作为载体蛋白,与小分子半抗原(合成多肽)偶联后用作免疫原,也可用于构建哮喘等 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业,制药/生物制药 |
产品描述
卵清白蛋白(Ovalbumin,Chicken Egg Albumin,OVA)是鸡蛋蛋白中含量较丰富的组分,属磷酸化糖蛋白。其多肽部分由385个氨基酸残基组成,分子量为42.7 kDa,氨基酸序列与已报道的信使RNA(mRNA)序列一致;结合碳水化合物(1428 g/mol)与磷酸酯基团(1600g/mol)后,全蛋白分子量约44.3 kDa,SDS-PAGE表观分子量约45 kDa。
卵清白蛋白是一种应用广泛的多功能蛋白:既可作为载体蛋白,与小分子半抗原(合成多肽)偶联后用作免疫原,也可用于构建哮喘等过敏性疾病动物模型;在EliCell实验中可作为细胞孵育介质,用于检测嗜酸性粒细胞释放的细胞因子;在蛋白电泳中还可作为约45 kDa的分子量指示蛋白。
本品为低内毒素级别,适用于对背景干扰敏感的体内造模及细胞学实验,主要应用于过敏性哮喘、变应性鼻炎等呼吸道变应性疾病动物模型的构建。本产品仅供科研使用,不作为临床诊断或治疗依据。
来源:鸡蛋白
基本信息
外观:类白色或淡黄色冷冻干燥粉末或无定形块状、鳞片状
可溶性/溶解性:溶于水和稀缓冲液
质量指标
纯度:不低于95%,低内毒素,免疫化学级
内毒素(Endotoxin):小于等于1.0 EU/mg
使用方法
本方案主要参考文献,为通用基础指导,仅供实验参考。OVA哮喘模型的建立受动物品系、周龄、性别、佐剂用量、给药途径、激发频次与周期及检测终点等多因素影响,不同文献的致敏剂量(20–100 µg)与佐剂用量(0.5–2.25 mg)差异较大。具体实施时,建议结合多篇文献及预实验结果,依据您的实验目的对剂量与时间点进行相应调整。
以小鼠急性哮喘病模型为例:
造模原理:通过腹腔注射OVA+Aluminum hydroxide佐剂实现系统致敏,诱导Th2型免疫应答及特异性IgE产生;再经气道局部滴鼻激发OVA,引发以嗜酸性粒细胞浸润为主的过敏性气道炎症,模拟人类过敏性哮喘。
实验动物:品系/周龄为雌性BALB/c小鼠,6–8周龄;饲养于SPF级环境,12 h光照/12 h黑暗循环,自由摄食饮水;每组10只(PBS对照组/OVA模型组/药物干预组)。
试剂与配制:致敏液为100 µg OVA+2.25 mgAluminum hydroxide佐剂,溶于200 µL PBS/只;激发液为100 µg OVA,溶于50 µL PBS/只。
造模时间线(第0–27天):第0、7、14天腹腔注射致敏液(100 µg OVA+2.25 mgAluminum hydroxide/200 µL PBS/只);第22、24、26天麻醉后滴鼻激发(100 µg OVA/50 µL PBS/只);第27天(末次激发后24 h)处死,检测各项指标。
分组设计(示例):Control组腹腔/滴鼻均给PBS;OVA/PBS组OVA致敏+OVA激发(模型组);OVA/药物组OVA致敏+OVA激发+药物干预(给药组可于每次激发前24 h滴鼻给药)。
造模成功检测与评价指标:
气道高反应性(AHR):末次激发24 h后,FlexiVent系统检测,梯度给予Methacholine(0、6.25、12.5、25、50 mg/mL),模型组呼吸阻力Rrs升高、弹性Ers升高、顺应性Crs降低。
BALF细胞分类计数:Wright-Giemsa染色,计数400个细胞,模型组嗜酸性粒细胞显著升高(为主要效应细胞),中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞相应变化。
肺组织病理(H&E):评估支气管周围/血管周围炎性细胞浸润,评分0–4级,模型组评分显著升高。
免疫组化:检测IL-22RA1、IL-10RB、IL-22BP等表达。
ELISA:肺匀浆及BALF中细胞因子水平检测。
注意事项
致敏阶段间隔7天、共3次,激发阶段间隔1天、共3次,务必按时间线执行以保证模型稳定性。
滴鼻前需充分麻醉,避免操作应激影响结果。
Aluminum hydroxide佐剂必须与OVA充分混匀后腹腔注射。
建议先做预实验确定较优剂量、动物品系及检测时间点。
储存/保存方法
2~8℃,有效期3年。
运输方式
蓝冰运输
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