产品分类
Product Category详细介绍
| 品牌 | absin | 货号 | abs9192 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 5g/25g/100g/500g | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 用于急性结肠炎、慢性结肠炎、结肠炎相关的结肠癌造模。 | 应用领域 | 医疗卫生,生物产业,制药/生物制药 |
描述
硫酸葡聚糖钠盐(Dextran sulfate sodium,DSS)是葡聚糖的聚阴离子衍生物,由葡聚糖和别的的酯化反应形成。其中含硫量约为17%,相当于葡聚糖分子的每个葡萄糖残糖中平均含1.9个硫酸基团。DSS具有几个特点:聚阴离子复合物,可溶于水,形成无色水溶液;纯度高,且具有良好的稳定性;可被肠道菌群代谢降解。
炎症性肠病(IBD)是慢性、易复发的肠道炎症性疾病,主要包括溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD),病程迁延,增加结直肠癌风险。DSS诱发结肠炎的机制是多方面的。其中一个关键途径是DSS与结肠中的中链脂肪酸(MCFAs)形成约200 nm大小的囊泡结构,这些囊泡能够与结肠上皮细胞膜融合,从而破坏肠道上皮屏障功能。此外,DSS还能直接通过诱导氧化应激、激活炎症信号通路等方式引发肠道炎症。
DSS结肠炎模型与人类UC在组织病理学、临床表现及炎症机制上高度相似,是IBD研究的经典工具。该模型操作简便、重复性高、灵活可控、成本经济,通过调整DSS浓度与给药周期,可建立急性、慢性及急慢性交替性模型,满足不同药效评价需求。
基本信息
外观:白色或类白色至淡黄色粉末
可溶性/溶解性:溶于水
应用
用于急性结肠炎、慢性结肠炎、结肠炎相关的结肠癌造模。
产品用途
本品仅供科研,不得用于其它用途。
使用方法
本方案为通用基础指导,仅供实验参考。DSS结肠炎模型的建立受动物品系、周龄、性别、DSS分子量、给药浓度、给药周期及检测终点等多因素影响,不同文献的DSS浓度(1%–5%,w/v)与给药天数(3–10天)差异较大。具体实施时,建议结合多篇文献及预实验结果,依据您的实验目的对DSS浓度、给药周期及采样时间点进行相应调整。
动物性别备注:本说明书造模方案默认使用雄性C57BL/6J;若选用雌性C57BL/6J小鼠,同等DSS浓度炎症损伤偏弱,受发情周期干扰,可适当上调DSS浓度,建议增大样本量。
一、DSS诱导急性结肠炎模型:
致病原理:DSS通过破坏肠道黏膜屏障完整性,激活固有免疫应答及氧化应激反应,诱导以中性粒细胞浸润为主的急性肠道炎症。
造模方案:动物为C57BL/6J小鼠,6–8周龄,18-22 g,雄性;给药方式为自由饮用DSS水溶液。
浓度风险提示:常规推荐2.5-3%(w/v),连续7天,重复性好,死亡率可控;2.5%-5%为浓度区间,4-5%属于高浓度,文献多用于3-5 d短期造模;若直接5%连续7天,会显著升高小鼠死亡率,不建议新手直接采用。
造模成功指标:表型为体重下降10%–20%、腹泻、便血、结肠明显缩短、DAI评分显著升高;病理为H&E染色可见黏膜损伤、隐窝结构破坏、炎性细胞浸润等。取材优先取远端结肠,4%多聚甲醛/10%中性福尔马林固定,制备横断面切片。可检测结肠组织MPO活性、促炎因子TNF-α、IL-6、IL-1β作为炎症辅助评价指标;MPO样本冻存不宜超过1周,活性会衰减。
DAI评分表:单项评分包括体重下降、粪便性状、出血情况,每项0-4分。DAI =(体重下降评分 + 粪便性状评分 + 便血评分)÷3;DAI最终范围0-4分;每日固定时间打分,盲法最佳,模型组平均DAI建议大于等于2.0。
重要实操提示:人道终点为体重下降大于等于20%,同时伴随精神萎靡、严重便血等状态,应严格遵循动物伦理审查方案;DSS给药期间每天同一时间称重+评分;文献存在两套算法,一部分文献直接三项分数相加(0-12分),一部分除以3得到0-4分,论文材料方法必须写明计算公式;应激会改变粪便性状,操作轻柔,不要频繁抓握小鼠。
HE病理评分(Cooper标准):包括隐窝结构损伤、炎症细胞浸润、肌层增厚、杯状细胞缺失、隐窝脓肿5个维度,总分0-11分;盲法对远端结肠横断面切片评分;每只动物建议选取大于等于3张非连续切片取平均值;DSS模型隐窝脓肿并不常见,远端结肠损伤最重;模型组病理评分建议大于等于4分。重要提醒:不能只看分数,必须和对照组做统计学比较;DAI是体表表型,HE病理为金标准;还要结合结肠长度等辅助指标;分数仅为参考阈值,不做绝对判定标准。
二、DSS诱导慢性结肠炎模型:
致病原理:DSS持续作用使肠道黏膜反复受损,免疫调节失衡与肠道微生物群落失调,导致炎症迁延不愈。
造模方案:动物为C57BL/6J小鼠,6–8周龄,18-22 g,雄性;给药方式为每个周期7天DSS(2%–3%,w/v)+ 14天正常饮水,重复3个周期。
造模成功指标:表型为体重下降、腹泻、便血、脾脏重量增大、结肠缩短;病理为H&E染色可见慢性炎症细胞浸润、隐窝结构破坏、杯状细胞减少等。
三、DSS诱导结肠炎相关的结肠癌模型:
致病原理:DSS诱导的长期肠道炎症环境会产生大量的炎症因子和氧化应激产物,会对肠道黏膜细胞的DNA造成损伤,引起基因突变,同时使细胞增殖与凋亡失衡,并形成利于肿瘤生长的微环境,进而引发结肠癌。
造模方案:动物为C57BL/6J小鼠,6–8周龄,18-22 g,雄性;致癌剂为腹腔注射偶氮甲烷(AOM),剂量10 mg/kg(注意:AOM为致癌试剂,操作需佩戴防护手套;试剂避光现配现用;动物实验设置人道终点);1周后开始DSS循环(2%–2.5% DSS,7天 + 正常饮水14天,重复3次)。
造模成功指标:表型为体重减轻、腹泻、血便及软便、结肠缩短变粗;内镜为第二轮DSS后1周可见远端结肠肿瘤;病理为H&E染色可见肿瘤形成、隐窝脓肿、炎症细胞浸润等。
注意事项
DSS粉末每次取用后尽快盖紧瓶盖,避免吸潮。溶液用无菌饮用水配制,现配现用,充分混匀。配制后的DSS水溶液4℃存放不超过48 h,不建议长期储存。
DSS水溶液禁止高压蒸汽灭菌;如需除菌,使用0.22 μm水系滤膜过滤。
建议每1-2天更换新鲜DSS溶液,确保浓度稳定并防止细菌污染。
建议每天固定时间称重、观察粪便性状和便血情况,保持操作一致性。
每日记录饮水量,因饮水量差异可能影响最终造模程度。
为减小饮水量个体差异,并便于观察造模进展,建议每笼饲养2–3只小鼠,最多不超过5只。雄性小鼠避免高密度饲养,打斗应激会干扰肠道炎症表型。
DSS正常是白色至类白色,若色泽显著加深(如深黄、棕黄),可能已氧化降解,不建议使用。
造模常见失败排查要点:DAI高但病理评分低,可能取材误取近端结肠或动物处死时间过早;DAI低但病理分数较高,可能个体局部肠道损伤或组内个体差异大;DAI、病理均偏低,可能DSS粉末氧化失效、饮水瓶漏液/堵塞实际摄入不足或本动物房小鼠肠道菌群对DSS耐受,建议提高DSS浓度重新预实验。提示:DSS损伤主要集中远端结肠,病理务必取远端结肠做横断面切片。
储存/保存方法
2~8°C密封干燥保存,有效期2年。
运输方式
蓝冰运输
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