详细介绍
品牌 | absin | 货号 | abs50193 |
---|---|---|---|
规格 | 10mL | 供货周期 | 一周 |
主要用途 | 细胞活性检测 |
描述 | 细胞活力检测有多种方法,如检测染料排除的,检测 ATP 产生的,检测酶对底物降价活性的等。荧光素酶检测法应用比较广泛,是基于活细胞产生 ATP 的能力的。由于是细胞检测,有时需要有内参对照,由此产生 multiplex 分析需求,即对同一多种分析方法同时检测,相互不干扰,彼此检测机理不同,如此可以进行相关对比,从而排除实验因素外的数据差异。国外 CellTiter Fluor (CTF)类产品就是基于这样的原理设计的。本公司自行研发推出了同类的荧光细胞活力检测试剂盒(Fluorescent Cell Viability Assay Kit),性能上与国外品牌产品无明显差异。本产品是基于细胞蛋白酶对多肽产物的降解,产生荧光信号。细胞膜完整性受损时,该蛋白酶就失去了对底物的降解活性。CTF-LTM与荧光素酶试剂盒检测原理不同,检测方法也不同,其检测灵敏度次于荧光素酶法,但是可以检测到更早期的轻微的细胞损害,两个检测相容性好,可以进行multiplex 检测。 产品特性: 1、性能 检测信号,Window,灵敏度与特异性与国外品牌同类产品类似。 2、相容性 与CTG等常用分析试剂相容,不形成相互影响。 3、特征 对细胞早期膜损伤更敏感。 4、便捷 “加入-混合—温育-检测",整个实验步骤简单,易操作。 产品组成: 蛋白酶底物,缓冲液混合后灌装于 10 mL 或 100 mL 的棕色瓶中及 2ml 管中,规格如下:
| |||||||||||||||
使用方法 | 1、细胞准备: (1)在 96 孔或 384 孔细胞培养板铺合适密度的待检测细胞。建议使用白板。 (2)准备待检化合物。将合适浓度的待检测化合物加到细胞板孔中。培养液中有机溶剂浓度保持在1~2%以下。设立未加化合物的对照组。根据项目需求继续培养合适的时间。 2、细胞活力检测: (1)取出 CTF-LTM细胞活力检测试剂,在室温平衡 20 分钟。轻摇混匀。 (2)配制 CTF 反应液:CTF 底物是 100x 的,用 CTF 缓冲液配成 1x 反应液,充分混匀,与待检测细胞等体积混合使用。 (4)向培养板孔内加入等体积的 CTF 反应液,轻摇 20 秒钟混匀,避光 37 ℃ 反应60~90 分钟。 (5)在读板仪上读取荧光信号,激发波长 380nm,发射波长 510nm。 (6)根据需要,继续进行下游的 multiplex 分析。 | |||||||||||||||
注意事项 | 1、试剂量:非经严格验证,不建议随意改变反应试剂用量。如使用 96 孔反应板,一般建议50uL培养液加等体积 CTF 反应液,后续检测再加与 CTF 反应液等体积的 multiplex 检测反应液(如CTG 反应液)。其它反应板作对应体积调节。建议将底物分装,每次从底物stock 新鲜配制反应液。 2、必要时调整培养板反应孔内的实际剩余培养液体积,以保证 multiplex 分析总体积不超过200uL(96 孔板)或 40 uL(384 孔培养板)。 3、读板时间:在加入试剂并于 37 ℃温育 30 分钟后,可以进行读板,但是其检测灵敏度低于37 ℃温育 60 分钟或 90 分钟的结果。 | |||||||||||||||
基本信息 | ||||||||||||||||
储存/保存方法 | -20℃及以下避光储存,有效期12个月。 |
产品咨询
电话
微信扫一扫