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品牌 | absin | 货号 | abs9519 |
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规格 | 50mL;100mL | 供货周期 | 现货 |
应用领域 | 化工,生物产业,农业,制药,综合 |
描述:
类器官冻存液(Organoid Cryopreservation Medium)可应用于多种哺乳动物( 如人、 鼠) 来源的类器官和细胞系的低温长期保存。
使用方法:
1. 向回收后的类器官(或细胞) 中加入预冷的(2-8℃)类器官冻存液,吹打混匀后迅速转移至细胞冻存管中(冻存管内细胞悬液体积应大于 0.5ml)。注意: 每 1ml 冻存液推荐冻存 1x103-1x107 个细胞或对应细胞量的类器官。
2. 将冻存管放入细胞冻存降温盒内(降温盒须提前平衡至室温或 4℃),随后立即将降温盒放入-80 ℃超低温冰箱中;也可将冻存管进行人工梯度降温处理,如 4℃ 静置 10 分钟,-20℃保存 1 小时,-80℃保存过夜。
3. 次日或 12 小时后将冻存管于低温条件下(不高于-70℃,推荐使用干冰或原降温盒)转移至液氮中长期保存。
若类器官(或细胞)复苏,可按以下步骤进行:
1. 取10 ml类器官培养缓冲液 B于15 ml离心管。
2. 从液氮罐中取出冻存的类器官细胞,快速置于 37℃水浴锅中融解。
3. 水浴融解过程中,需轻轻摇动冷冻管,以确保冻存液在 1-2 分钟内融解。
4. 将溶解后的类器官细胞快速转移至15 ml离心管,使用移液管轻轻吹打6-8次,300 g离心5分钟,然后除去上清液并收集类器官细胞沉淀。添加适量类器官缓冲液 B重悬移入1.5 ml离心管300 g离心5 min。
5. 基质胶重悬,每孔25 ul基质胶铺在24孔细胞培养板中,放置培养箱中10-15 min成胶,添加500 ul类器官培养基 A。
注:类器官冻存液(abs9519)可搭配类器官培养基使用。
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