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核酸共转染试剂

简要描述:核酸共转染试剂盒是我们研发的专门用于将质粒 DNA、siRNA 或 mimics 共同转染于同一细胞的试剂盒。它具有非常好的转染性能,可将质粒 DNA 和 siRNA 高效地共转染于绝大多数贴壁细胞和原代细胞。

  • 产品型号:abs60317
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-03-05
  • 访  问  量:726

详细介绍

品牌absinCAS-
分子式-纯度-
分子量-货号abs60317
规格0.5ml;1.0ml;1.5ml供货周期现货
主要用途专门用于将质粒 DNA、siRNA 或 mimics 共同转染于同一细胞的试剂盒应用领域生物产业

产品介绍:

核酸共转染试剂盒是我们研发的专门用于将质粒 DNA、siRNA 或 mimics 共同转染于同一细胞的试剂盒。它具有非常好的转染性能,可将质粒 DNA 和 siRNA 高效地共转染于绝大多数贴壁细胞和原代细胞。在贴壁细胞中,质粒 DNA 转染效率可高达 90%以上,siRNA 在质粒转染阳性细胞中共转染效率可高达 95%以上。其功能强大,不仅可高效转染质粒 DNA 和 siRNA,还可高效转染 mRNA、mimics、反义核酸和各种小分子 DNA。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同,我们的共转染试剂 采用生物可降解材料配制,对细胞的毒性很低,转染后 24 小时细胞死亡率不到 10%。使用也非常方便,先将转染试剂与质粒 DNA 和 siRNA 混合,再将该转染复合物直接加入培养细胞中,血清不影响其转染效果,不必刻意添加或更换培养液,操作十分简便。

产品特点:

1、强大的质粒DNA与siRNA共转染性能,可高效转染多种贴壁细胞和原代细胞,质粒DNA转染效率在贴壁细胞中可高达90%以上,siRNA在质粒转染阳性细胞中共转染效率高达95%以上;
2、共转染功能强大,不仅可将质粒DNA与siRNA共转染于同一细胞,还可共转染mRNA、mimics、反义核酸于同一细胞;
3、极低的细胞毒性:使用可降解生物材料,细胞毒性低,转染细胞死亡率不到10%,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响。


操作步骤(以 24 孔板转染为例):


A、 细胞接种:
1、转染前一天对细胞进行转接,每孔接种1.5×105个细胞,使转染时细胞密度为80-90%,且生长良好(非常重要);
2、 最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基,以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。


B、试剂A转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染):
1、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基,再加入适量的转染试剂,见附表。用移液器轻轻混匀,室温静置5分钟。
2、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基,再加入适量的DNA,轻轻混匀,之后再加入适量的siRNA,见附表。用移液器再次轻轻 混匀,室温静置5分钟。
3、将DNA-siRNA-培养基混合物滴加至试剂A-培养基混合物中,用移液器轻轻混匀,室温静置15~20分钟,立即转染。注意:试剂A-培养基混合物和DNA-siRNA-培养基混合物的混合次序非常重要,切勿颠倒。注意:离心管最好使用聚丙烯离心管。


C、转染:
1、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中,边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后,立即将培养板转入培养箱继续培养。
2、 培养24-48小时后观察或进行下一步实验。
3、试剂A在培养基中仍有较高的转染效率,因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。


附表 1:不同培养体系推荐初始转染条件


培养皿96 孔板48 孔板24 孔板12 孔板6 孔板10cm 皿
培养基、试剂、核酸量无血清培养基(μl)2x102x252x502x1002x2002x1000
试剂A (μl)0.51.32.551050
1μg/μl plasmid (μl)0.160.40.81.63.216
siRNA (pmol)38153060300
培养基(ml)0.10.250.51210




储存/保存方法:

-20°C 保存,有效期一年,使用前请轻轻混匀。


注意事项:

1、刚开始转染,请务必进行优化实验,如24孔板质粒转染,每孔质粒用量0.8ug,siRNA用量15pmol,试剂A可选择2.0ul、2.5ul、3.0ul进行优化。或者,每孔质粒用量0.8ug,试剂A用量2.5ul,siRNA用量选择10pmol、15pmol、20pmol、25pmol进行优化。
2、在制备DNA-siRNA转染复合物时,应避免体系中存在血清,因血清会干扰试剂A与DNA、siRNA形成复合物。培养体系中尽量不要添加抗生素,抗生素会导致培养细胞死亡。


**温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究

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