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质粒DNA转染试剂盒(贴壁细胞)

简要描述:这款产品是在DeofectEU Transfection Reagent的基础上进一步优化研发成功的专门用于质粒DNA细胞转染的转染试剂。它具有非常好的转染性能,可高效转染多种贴壁细胞、原代细胞和悬浮细胞,转染效率在贴壁细胞中高达90%以上(EGFP质粒)。

  • 产品型号:abs60255
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-08-18
  • 访  问  量:171

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详细介绍

品牌absinCAS-
分子式-纯度-
分子量-货号abs60255
规格0.5ml;1.0ml;1.5ml供货周期现货
主要用途专门用于质粒DNA细胞转染的转染试剂应用领域生物产业

产品介绍:
这款产品是在DeofectEU Transfection Reagent的基础上进一步优化研发成功的专门用于质粒DNA细胞转染的转染试剂。它具有非常好的转染性能,可高效转染多种贴壁细胞、原代细胞和悬浮细胞,转染效率在贴壁细胞中高达90%以上(EGFP质粒)。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同,它采用生物可降解材料配制,对细胞的毒性很低,转染后细胞死亡率不到10%。这款产品使用也非常方便,先将转染试剂与质粒DNA混合,再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中,血清不影响其转染效果,不必刻意添加或更换培养液,操作十分简便。


产品特点:
1、强大的细胞转染性能:可高效转染多种贴壁细胞、原代细胞和悬浮细胞,转染效率在贴壁细胞中高达90%以上;
2、极低的细胞毒性:使用可降解生物材料,细胞毒性低,转染细胞死亡率不到10%,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响,实验结果更为客观;
3、操作简便,可用于含血清培养基培养细胞的转染,转染前后不需要更换培养液。



试剂盒包装
货 号R试剂Trans buffer
abs60255-0.5ml0.5ml20ml
abs60255-1.0ml1.0ml40ml
abs60255-1.5ml1.5ml60ml






方法步骤(以24孔板转染为例):


A、细胞接种:
1、转染前24小时左右对细胞进行转接,培养过夜。
2、确保转染时细胞密度为90%左右。
3、最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基,以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。


B、R /DNA转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染):
1、在1.5ml无菌离心管中加入50ul Trans buffer,再加入适量的转染试剂,见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。
2、在1.5ml无菌离心管中加入50ul Trans buffer,再加入适量的DNA,见附表。用移液器再次轻轻混匀后在室温静置5分钟。
3、将DNA-Trans buffer混合物滴加至R-Trans buffer混合物中,用移液器轻轻混匀后在室温静置15-20分钟后,立即转染。

注意: R-Trans buffer混合物和DNA-Trans buffer混合物的混合顺序非常重要,切勿颠倒。注意:离心管最好使用聚丙烯离心管。


C、转染:
1、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中,边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后,立即将培养板转入培养箱继续培养。
2、培养12小时后即可观察,最佳观察或收获时间为24-48小时。
3、R在培养基中仍有较高的转染效率,因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。如果转染后需要更换新鲜培养基,请于加入R/DNA复合物12-24小时后进行。


储存/保存方法:

-20℃避光保存,Trans buffer 可保存于2-8°C,有效期1年,使用前轻轻混匀。


技术指标:

附表:不同培养体系推荐初始转染条件


培养皿96 孔板48 孔板24 孔板12 孔板6 孔板10cm 皿
表面积cm20.351.01.93.89.659
Trans buffer、试剂、DNA 量Trans buffer(ul)20501002004002000
R (ul)0.51.32.55.01050
1μg/μl plasmid (ul)0.160.40.81.63.216
培养基(ml)0.100.250.501.02.010




产品用途:

适用细胞系:293T,A549,B16F10,HEK 293,HeLa,Hepa 1-6,Hepa 1cLc7,HepG2,BHK-21,BNL.CL2,BRL-3A,C2C12,C6,CHO-K1,Clone 9,COS-1,COS-7,Daoy,DBTRG-05MG,DI-TNC1,DU 145,HLF-a,Huh-7,K562,KB,KLN 205,Lυ2 (LLC1),NCaP-FGC,MCF-7,MEL,Neuro-2a,NIH3T3,OVCAR3, PC3,PC-12等。


注意事项:

1、转染前的细胞汇合度以90%左右为宜,转染时细胞生长状态应保持良好,不要有支原体污染。

2、刚开始转染,建议进行优化实验,如24孔培养板,每孔质粒用量 0.8ug,转染试剂用量可选择2.0ul、2.5ul、3.0ul、3.5ul进行优化。

3、应避免转染复合物制备体系中存在血清,因血清会干扰R与 DNA形成复合物,培养基中尽量不要使用抗生素。

4、如果需要稳转,请在转染24-48小时后加入筛选培养基。

5、本试剂盒主要用于质粒DNA转染,如需质粒DNA、RNA、siRNA均可转染的试剂,请选择核酸转染试剂盒(#abs60259)。

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