全国服务咨询热线:

Products产品中心
首页 > 产品中心 > 分子生物学 > 分子热卖 > abs60327SP悬浮细胞质粒DNA转染试剂盒

SP悬浮细胞质粒DNA转染试剂盒

简要描述:该产品是我们研发团队在贴壁细胞质粒DNA转染试剂的基础上进一步优化研发成功的专门用于悬浮细胞质粒DNA转染的试剂。它具有非常好的转染性能,可高效转染多种悬浮细胞,转染效率在悬浮细胞中可高达85%以上(巨噬细胞、EGFP质粒)。

  • 产品型号:abs60327
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-10-20
  • 访  问  量:283

相关文章

Related Articles

详细介绍

品牌absinCAS-
分子式-纯度-
分子量-货号abs60327
规格0.1ml;0.5ml;1.0ml;1.5ml供货周期现货
主要用途专门用于悬浮细胞质粒DNA转染的试剂应用领域化工,生物产业,综合

产品简介: 

该产品是我们研发团队在贴壁细胞质粒DNA转染试剂的基础上进一步优化研发成功的专门用于悬浮细胞质粒DNA转染的试剂。它具有非常好的转染性能,可高效转染多种悬浮细胞,转染效率在悬浮细胞中可高达85%以上(巨噬细胞、EGFP质粒)。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同,它采用生物可降解材料配制,对细胞的毒性很低,转染后细胞死亡率不到10%。其使用也非常方便,先将转染试剂与质粒DNA混合,再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中,血清不影响其转染效果,不必刻意添加或更换培养液,操作十分简便。


产品特点:

1、较好的细胞转染性能:可高效转染多种悬浮细胞,转染效率可高达85%以上;

2、极低的细胞毒性:使用可降解生物材料,细胞毒性低,转染细胞死亡率不到10%,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响,实验结果更为客观;

3、操作简便,可用于含血清培养基培养细胞的转染,转染前后不需要更换培养液。


应用:

适用细胞系:293F,THP-1、RAW264.7、BMDM、CHO-S、Jurkat, K562、U937,NB4、MSCs等。


操作步骤 (以24 孔板转染为例):


A、 细胞接种:

1、 转染前一天或者两天接种细胞,接种细胞量为2-4×105 个。

2、 确保转染时细胞比活度为90%以上,且生长状态良好。

3、 如果细胞在转染前一天铺板,转染时可以不用换液,如果细胞在转染前两天铺板,转染时最好换液。


B、 SP/DNA转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染):

1、 在1.5 ml无菌离心管中加入50 ul Trans buffer,再加入适量的DNA,见附表。用移液器轻轻混匀成DNA稀释液。

2、使用前用移液器吹打混匀转染试剂,立即往DNA稀释液中加入适量的转染试剂,用移液器轻轻混匀。

3、 将SP/DNA复合物室温静置15分钟后,立即转染。
注意:离心管最好使用聚丙烯离心管。


C、转染:

1、将拟转染细胞强烈振荡20-40秒,确保培养细胞分散成单细胞悬液,无细胞结团;

2、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中,边加边轻轻晃动培养板。加完后,立即将培养板转入培养箱继续培养。

3、 培养24-96小时后收获。

4、 SP在培养基中仍有较高的转染效率,因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。因收获蛋白需要,可以使用悬浮细胞培养专用的无血清培养基。

附表:不同培养体系推荐初始转染条件

培养皿96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板10cm皿
表面积(cm2)0.351.01.93.89.659
Trans buffer、试剂、DNA量Trans buffer (ul)1025501002001000
SP (ul)0.250.61.22.44.824
1ug/ul plasmid (ul)0.160.40.81.63.216
培养基(ml)0.100.250.501.02.010




保存方法:

2-8℃避光保存,Trans buffer可保存于2-8℃有效期一年,使用前请先将本品轻轻混匀。

注意事项:

、1、对于24孔板,转染前接种细胞量以(2-4)x105细胞为宜,转染时细胞生长状态应保持良好,不要有支原体污染。

2、刚开始转染,建议进行优化实验,如24孔板,可将细胞接种3个孔,每孔接种细胞数分别为2x105 、 3x105 、4x105,次日质粒转染,转染24小时后观察转染效果,选择转染阳性率较高的细胞接种数进行后续实验。
3、应避免转染复合物制备体系中存在血清,因血清会干扰 SP 与DNA形成复合物,转染所用培养基中尽量不要使用抗生素。
4、为了提高转染效率,转染后培养板可放于微型振荡器上培养或每隔1小时人工振荡1次(非常重要)。
5、悬浮细胞转染难度大,且受细胞种类、细胞密度、细胞生长情况、培养方法、操作手法等因素的影响,研究者在转染之前,应查阅相关文献,认真准备转染方案。
6、本试剂主要用于质粒DNA转染,如需质粒DNA、RNA、siRNA均可转染的试剂,请选择SP悬浮细胞核酸转染试剂(abs60325)。





产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
爱必信(上海)生物科技有限公司
地址:上海市浦东新区新浩路58号申江科创园18栋
邮箱:info@absin.cn
传真:
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息