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PI细胞周期与凋亡试剂盒

简要描述:PI细胞周期与凋亡试剂盒产品基于碘化丙啶(Propidium, PI)染色方法分析细胞周期 和凋亡。碘化丙啶是一种双链DNA染料,其嵌入双链DNA中可以 产生荧光,荧光的强度和双链DNA的量成正比。

  • 产品型号:abs50005
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2021-12-15
  • 访  问  量:67

详细介绍

品牌自营品牌货号abs50005
供货周期现货应用领域生物产业
产品描述
描述

        本产品基于碘化丙啶(Propidium, PI)染色方法分析细胞周期 和凋亡。碘化丙啶是一种双链DNA染料,其嵌入双链DNA中可以 产生荧光,荧光的强度和双链DNA的量成正比。

        在正常细胞周期中,G0和G1期有1套染色体,G2和M期细胞 有2套染色体,S期介于两者之间。经PI染色后,处在不同细胞周 期中的细胞的荧光强度不同。假定G0和G1期的细胞荧光强度为 1,那么G2和M期的细胞的荧光强度为2,S期的细胞介于1和2之 间。

        PI细胞周期与凋亡试剂盒细胞凋亡时,由于细胞核皱缩和DNA的片段化,染色时DNAd的片 段会从打孔的细胞膜处丢失,流式细胞仪检测时,荧光强度小于 1,即Sub-G1峰或者凋亡细胞峰。

        细胞凋亡也可以用流式细胞仪观察细胞光散射的变化来检 测。凋亡前期,染色质皱缩,细胞密度增加,前向角光散色显著 降低。凋亡后期,细胞产生凋亡小体,前向角光散射和侧向角光 散色都显著降低。

PI细胞周期与凋亡试剂盒产品组分:

编号名称50T
APropidium Iodide(20×)1.25ml 
BRNase A(50×)500 μl 
CStaining Buffer25ml
应用
本产品用于培养的贴壁细胞或者悬浮细胞检测,也可用于组织细胞检测。
使用方法
自备耗材和设备:
1 ml 移液器
100-200 μl 移液器
旋窝混匀仪
流式细胞仪
PBS
75%乙醇

适用实验与操作过程:
1、细胞准备 贴壁细胞:弃细胞培养液,胰酶消化,制备单细胞悬液, 1000 g离心5分钟,弃上清。沉淀用1 ml预冷的PBS重悬。再次 1000 g离心5分钟,弃上清。 悬浮细胞:收集细胞悬液,1000 g离心5分钟,弃上清。沉淀 用1 ml预冷的PBS重悬。再次1000 g离心5分钟,弃上清。 组织细胞:将组织块用剪刀剪成尽量小的小块后,用0.25%的 胰酶消化0.5-1个小时。经过200-400目筛网过滤得到单细胞悬液。 1000 g离心5分钟,弃上清,沉淀用1 ml预冷的PBS重悬。再次 1000 g离心5分钟,弃上清。 注意,最后一次离心,弃上清后留50 μl上清,涡旋混匀。
2、细胞固定 细胞沉淀用1 ml -20 ℃预冷的75%乙醇轻轻混匀,4℃固定2小 时以上或者过夜。然后,1000 g离心5分钟,轻轻弃上清,沉淀用1 ml预冷的PBS重悬,1000 g离心5分钟,弃上清。
3、染色 PI染色工作液配置: 0.5 ml染色缓冲液(C液)中加入25μl PI 染液(A液)和10 μl RNase A(B液),混匀待用。每个细胞样品 加入0.5 ml配置好的PI染色工作液,轻轻混匀重悬细胞。37℃,避 光孵育30分钟,直接上流式细胞仪检测(5小时内完成为佳)。激 发波长为488 nm,检测红色荧光。 注意:每个检测细胞数不超过1×106个。
注意事项
1、PI具有毒性,操作时应注意防护,保护眼睛、避免吸入、并戴一次性手套。
2、PI存在淬灭现象,保存和使用过程中注意避光。
基本信息
别名
PI细胞周期与凋亡试剂盒
储存/保存方法
-20 ℃避光保存,有效期12个月。
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究


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