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  • Rel/NF-κB蛋白是一种二聚体、DNA序列特异性转录因子,在几乎所有多细胞生物中协调炎症反应、先天免疫和适应性免疫以及细胞分化、增殖和存活。在大多数细胞中,NF-κB存在于与IkappaB结合的非活性复合物的细胞质中。NF-κB网络由五个家族成员蛋白质单体(p65/RelA、RelB、cRel、p50和p52)组成,它们形成同二聚体或异二聚体,差异地结合DNA,并受两种途径的调控:典型的NF-κB必需调节剂(NEMO)依赖途径和非特异的NEMO独立途径。NF-κB通路示意...

    2020-06-24
  • 血清的热灭活是很多培养者感兴趣的话题,价格不菲的血清中含有诸如生长因子,维生素,氨基酸等珍贵物质,而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟是*没有必要的。尽管如此,在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行,多数实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子、氨基酸等成分带来的负面影响,下面我们就对胎牛血清的热灭活进行一些探讨和解释。清热灭活操作步骤:①选用与血清瓶同规格的对照瓶一个。②对照瓶内放入与血清等体积的水。③温度预试。对照瓶内插入2—3支经挑选的温度计(保证测试温度...

    2020-06-22
  • 近日,nature刊登了一篇文章阐述了中性粒细胞胞外陷阱DNA通过CCDC25促进肿瘤转移的机制,小编看到后也是跟大家来分享下:摘自nature中性粒细胞胞外陷阱(NETs)是由染色质DNA丝状物和颗粒蛋白包裹而成,由中性粒细胞释放,以捕捉微生物体。近的研究表明,在小鼠模型中,NETs的DNA成分(NET-DNA)与肿瘤转移有关。然而,NET-DNA在肿瘤转移中的作用和临床意义尚不清楚。文章结果表明,NETs在乳腺癌和结肠癌肝转移中含量丰富,血清NETs可预测早期乳腺癌肝转移...

    2020-06-17
  • 细胞极性建立、极化的细胞迁移、胞内囊泡运输以及有丝分裂中的染色体分离都需要微管。微管(MTs)是α/β-微管蛋白异二聚体的非平衡聚合物,其中组装后即在β-微管蛋白处发生GTP水解。绝大多数微管从组织中心成核。普遍的微管行为就是动态不稳定性,这个过程表现为正端缓慢生长,伴随快速的解聚作用(“灾难”)并随之复苏。虽然微管的负端表现出动态不稳定性,尽管速率低于正端,负端通常有限制并固定在MT组织中心,因此通常不会参与微观动力过程。在动态不稳定和稳定的微管间维持平衡,大部分通过结合微...

    2020-06-17
  • 蛋白免疫印迹实验(WesternBlot)实验大家肯定都不陌生,要想做出好看的条带,从制胶开始就不容半点马虎。WB制胶可谓实验室新手的必修课了,想想小编我在当初实验室的时候,就没少帮师兄师姐配置WB凝胶,泛黄的配方表小编还记忆犹新。WB凝胶配方表说起WB凝胶配置,小编可有一肚子苦水要倒,让人头疼的一点就是多种溶液都需要计算量取,每次调移液器就要调半天。还有各种试剂的保存条件也不一样,配胶之前还需要从冰箱,室温柜子里分别拿出不同的溶液。这还不算,容易出问题的促凝剂APS,需要新...

    2020-06-09
  • 做多了IHC实验的小伙伴,相信对于抗原修复都不陌生,这看似简单的一小步,往往会对IHC实验产生显著影响。爱必信作为您身边的科研百宝箱,秉持着严谨认真的态度,为您总结了一系列从修复缓冲液、煮沸装置到修复方法,注意事项的小技巧,希望这些小细节能完善您的实验,像爱必信一直坚信的一样,从小处入手,时刻陪伴您的科研生活,助力实验大成功。抗原修复是针对石蜡包埋的切片的必要步骤,大多数甲醛固定的组织在开始染色前都要先修复抗原,这是由于在固定过程中产生了亚甲基桥使蛋白之间交联屏蔽了抗原位点。...

    2020-05-29
  • 蛋白质印迹(WesternBlot),相信大家对此都不陌生,做为检测蛋白表达及半定量的基础实验方法,也是很多小伙伴们初入实验室的入门课。“上手容易,精通难”可谓对WB实验的注释,初入实验室的“菜鸟”可以很快上手,做出漂亮的条带,做过多年的“大神”也可能一着不慎,实验“翻车”,结果一塌糊涂。有些实验室甚至流传着一些所谓的“玄学”,新手人品好,难做的条带给新手做等等。真的是这样么?实验技术可不是拼人品,靠运气的事儿,接下来小编将会为大家带来WB进阶技巧系列,干货满满,让大家提升W...

    2020-05-26
  • 蛋白质印迹(WB)用于测量不同条件下特定蛋白的变化。在蛋白质印迹(WB)过程中涉及许多步骤,包括样品制备、电泳、蛋白转移、抗体孵育和信号检测。为了解释蛋白质印迹实验的结果,一个贯穿全过程的内参是必须的。内参可保证每个泳道中加入了相同量的蛋白样品,不同泳道上的蛋白以相同的效率从凝胶转到膜上,不同泳道上抗体孵育(对于一抗而言,必要的话也包括二抗)、信号检测都是一致的。内参的信号通常用来对目标蛋白的信号进行标准化。需要强调的是,对照蛋白抗体应该与实验抗体在相同的印迹上进行。不同的样...

    2020-05-22
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