酶解法作为单细胞悬液制备常用方法之一，通过利用特定酶进行相应的化学反应除掉一些特定结构，适合将小块组织消化成为单个细胞。胶原酶是单细胞组织消化的重要酶种。胶原酶消化在单细胞样本制备过程中，是不能缺少的一步。另外，组织解离常见的消化酶还有胰蛋白酶、脱氧核糖核酸酶Ⅰ、透明质酸酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、弹性蛋白酶，不同酶适用于不同的组织类型。一、胶原酶胶原酶（Collagenase）主要水解结缔组织中胶原蛋白成分。目前商用胶原酶是从溶组织梭状细胞芽孢杆菌提取制备的，分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ...

在样本制备的过程中，往往会应用一些试剂（如多聚甲醛、福尔马林等）对新鲜组织进行处理，这个过程可能导致抗原位点被封闭，为了避免影响后续免疫染色的效果，我们需要先对切片进行抗原修复。对于石蜡切片来说，抗原修复是必须的步骤，常用的方法有酶消化法和热修复法。1、酶消化法作为最早的抗原修复方法，常用的消化酶有三：胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K。但酶的作用极易受温度影响，如果消化不足，则无法充分暴露出抗原位点，过度的消化又会破坏组织结构，影响最后阳性信号的判读，因此在后续的发展中，酶消化法...

2023年1月10日，《Science》发文，FDA不再要求新药研制进行动物实验。2022年12月底，美国总统签署法案，新药无需在动物身上进行测试也可获得美国食品和药物管理局(FDA)的批准。对于动物福利组织来说这一转变无疑是重大的。该法案代替了1983年的规定，要求新药与化妆品产品开发，皆需进行动物试验。Drake的团队和一些非营利性的动物健康组织认为在批准药物进行人体试验时，FDA应更多地依靠计算机建模、"器官芯片"和其他在过去10至15年中开发的非动物方法。这一举措是否...

早在30多年前，科学家们就构思出基于mRNA的核酸疫苗，能够开发出安全和多功能的核酸疫苗。如今随着mRNA技术的不断发展，这一愿望终于照进现实，新冠mRNA疫苗开发成功并投入生产，推动了mRNA疫苗在他传染病领域、癌症、罕见病等领域的研发进展。2021年8月25日，NatureReviewsDrugDiscovery发表了一篇深度综述，详细介绍了mRNA疫苗的技术基础，以及传染病mRNA疫苗开发的最近进展和关键问题。图1在这篇综述中，作者描述了mRNA疫苗的技术基础，包括mR...

2019年底爆发的SARS-CoV-2，随着疫情的放开，感染人数激增，尤其是老年患者，新冠口服药的需求愈发旺盛。根据媒体报道，2023年1月8日，新冠治疗药品阿兹夫定片、清肺排毒颗粒经过谈判纳入国家医保目录，而辉瑞的Paxlovid因报价高谈判失败。为保障新冠用药，国家医保局医药服务管理司的副司长黄心宇在1月11日的新闻发布会上表示，按现行的新冠药品报销政策，Paxlovid仍可临时报销至2023年3月31日。当前，全球新冠口服药的研发分为两大技术阵营：以辉瑞Paxlovid...

RNA可以通过它是否编码为蛋白质被分为编码RNA和非编码RNA。编码RNA主要是mRNA，而在非编码RNA这一块，我们今天的主角microRNAs（miRNAs）主要属于非编码RNA中的短链非编码RNA。miRNA大小长约20-25个核苷酸，由高等真核生物基因组编码，通过和靶基因mRNA碱基配对引导沉默复合体（RISC）降解mRNA或阻碍其翻译。图1RNA的分类虽然第一个miRNA早在1993年被发现，一直到最近几年这类基因的多样性和广泛性才被揭示出来。目前，已有大量的研究结...

人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）是于1970年建自骨瘤转移灶的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系经3次克隆后的亚系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。该细胞的密度可高达106cells/cm2，具有中等水平的多巴胺β羟化酶的活性。基本形态上皮样，多数贴壁，少数悬浮；营养体系：推荐DMEM：F12(abs9561)+10%FBS(abs972)+1%P/S（abs9244）。表1SH-SY5Y细胞基本信息SH-SY5Y（人神经母细胞瘤细胞）形态上皮样...

病理性神经（neuropathicpain）是由躯体感觉系统的损害或疾病导致的疼痛，患者的临床症状表现为各种各样的疼痛。它的成因和发病机制都十分复杂，外伤、感染、中毒、肿瘤、神经压迫、免疫与遗传等多种病因均可导致神经损伤，发病机制包括外周敏化、中枢敏化、下行抑制系统的失能、脊髓胶质细胞的活化、离子通道的改变等。近日，浙江大学医学院脑科学与脑医学学院高志华团队联合浙江大学医学院附属第一医院骨科王跃团队在JCIINSIGHT在线发表题为“mTOR-neuropeptideYsig...