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关于重组蛋白,你真的了解它吗?

更新时间:2024-06-19      点击次数:151

重组蛋白是指利用DNA重组技术或重组RNA技术从而获得并生产的蛋白质。具体操作流程可以概括为利用中心法则采用基因重组分子克隆技术,获得可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。重组蛋白获得的途径分为体内和体外生产,表达系统主要分为原核表达系统和真核表达系统。原核表达系统最常见的是利用大肠杆菌进行表达,真核表达系统主要为酵母蛋白表达、哺乳动物细胞蛋白表达(常用的细胞为CHO细胞、HEK293细胞)、昆虫细胞蛋白表达。

 

图 重组蛋白四大表达系统

 

重组蛋白技术主要用于科学研究、生物制药、疫苗开发以及诊断试剂研发等领域,能够大量生产具有特定生物学活性、药理活性或科研价值的蛋白质,例如细胞因子、激素、酶、抗体(包括单克隆抗体)、治疗性蛋白以及其他功能性蛋白等。迄今为止,已有超过130种重组蛋白获得美国FDA批准用于临床,然而,世界有超过170种重组蛋白被生产和用于医学。重组蛋白是有效的药物,不会产生脱靶副作用,而且比小分子药物的开发时间更短,克服了传统提取方法产量低、纯度难以控制的问题。现在所有大型制药公司都将重组蛋白作为药物来开发,经过30余年发展,重组蛋白药物已成为现代生物制药领域最重要的产品之一,占据生物药市场三分之一以上的份额。根据Frost&Sullivan数据,在中国,重组蛋白生物科研试剂总体市场从2016年的5亿元增长到2019年的9亿元,期间年复合增长率为20.0%,预计2024年市场规模将达到19亿元,2019年至2024年间年复合增长率为17.9%。尽管我国重组蛋白技术起步较晚,随着国内技术水平的提升和市场竞争的加剧,国产替代的进程有望加快。

 

重组蛋白生产流程:

 

1)获取cDNA并创建表达克隆:首先需要获取目标蛋白质的cDNA序列,并将其克隆到表达载体中,以便于在宿主细胞中表达;

2)克隆:将含有目标蛋白基因的表达载体转移到宿主细胞中;

3)在合适的系统中表达蛋白质:选择合适的宿主细胞系统进行蛋白质的表达,表达系统可以是大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞等;

4)小规模试验表达:在小规模条件下进行蛋白质的表达试验,以确定表达条件和蛋白质的产量;

5)蛋白纯化:通过各种层析技术,如离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等,从宿主细胞的裂解物中纯化出目标蛋白质;

6)质量控制:对纯化后的蛋白质进行表征,包括其分子大小、纯度、活性等;

7)扩大生产:如果需要大量重组蛋白,可以通过在生物反应器中培养转化的宿主细胞来扩大生产过程。生物反应器为细胞生长和大规模重组蛋白生产提供了受控环境。

 

常见重组蛋白类型:

 

重组蛋白的类型包括治疗蛋白、工业酶、诊断蛋白、研究工具、疫苗、生物材料、生物工程、生物传感器和生物催化剂。已被广泛应用于蛋白结构研究、免疫检测试剂、重组蛋白药物、诊断试剂开发、抗体药物靶点、CAR-T 细胞治疗靶点、Fc 受体、流感病毒蛋白和细胞因子等大多数热门研究领域。下面给大家介绍比较热门的重组蛋白。

 

1、白细胞介素(Interleukin, IL)

由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。IL在传递信息,激活与调节免疫细胞,介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用,是淋巴因子(1ymphokins)家族中的成员,由淋巴细胞、巨噬细胞等产生。白细胞介素都是通过与靶细胞表面的细胞因子受体特异性结合来发挥其生物学效应,这些效应包括促进靶细胞的增殖和分Chemicalbook化,增强抗感染和杀伤肿瘤细胞效应,促进或抑制其他细胞因子合成,促进炎症过程,影响细胞代谢等。

 

Absin白细胞介素类重组蛋白产品清单

货号

产品名称

规格

abs00970

Recombinant Mouse IL-2 Protein

5ug

abs00971

Recombinant Mouse IL-3 Protein

10ug

abs00975

Recombinant Mouse IL-7 Protein

10ug

abs00985

Recombinant Mouse IL-33 Protein

10ug

abs04100

Recombinant Mouse IL‐2 Protein

10ug

abs04697

Recombinant Mouse IL-4 Protein

10ug

abs04044

Recombinant Human IL-6 Protein

10ug

abs04045

Recombinant Human IL-2 Protein

10ug

abs04046

Recombinant Human IL-15 Protein

10ug

abs04047

Recombinant Human IL-17A Protein

10ug

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2、干扰素(interferon, IFN)

干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质(主要是糖蛋白),是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长,以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。

 

Absin干扰素类重组蛋白产品清单

货号

产品名称

规格

abs00809

Recombinant Human IL-7 Protein

10ug

abs00918

Recombinant Human IL-29 Protein

5ug

abs05109

Recombinant Human IFN-γ Protein(C-10His)

50ug

abs04123

Recombinant Human IFN-γ Protein(E.coli)

10ug

abs01021

Recombinant Mouse IFN-γ Protein

100ug

abs04127

Recombinant Mouse IFNγ Protein(E.coli)

10ug

abs04129

Recombinant Mouse Interferon α-2 Protein

10ug

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3、集落刺激因子(colony stimulating factor, CSF)

一组在体内外均可选择性刺激造血祖细胞增殖、分化并形成某一谱系细胞集落的细胞因子,包括巨噬细胞CSF、粒细胞CSF、巨噬细胞/粒细胞CSF、干细胞因子等。

 

Absin集落刺激因子类重组蛋白产品清单

货号

产品名称

规格

abs04383

Recombinant Mouse CSF1 Protein

10ug

abs00994

Recombinant Mouse GM-CSF Protein

5ug

abs00839

Recombinant Human GM-CSF Protein

100ug

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4、生长因子(growth factor, GF)

一类可介导不同类型细胞生长和分化的细胞因子,根据其功能和所作用细胞的不同,分别命名为转化生长因子(TGF)、神经生长因子(NGF)、表皮生长因子(EGF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)等。

 

Absin生长因子类重组蛋白产品清单

货号

产品名称

规格

abs04176

Recombinant Human Epidermal Growth Factor Protein

10ug

abs04204

Recombinant Human TGFB1 Protein

10ug

abs05144

Recombinant Human FGF-basic (154aa) Protein

10ug

abs05161

Recombinant Human VEGF165 Protein

10ug

abs01006

Recombinant Mouse bFGF Protein

10ug

abs04222

Recombinant Mouse TGF-β1 Protein

10ug

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5、趋化性细胞因子(chemokine)

一类对不同靶细胞具有趋化效应的细胞因子家族,可由白细胞和某些组织细胞分泌,是一个包括60多个成员的蛋白质家族。大部分成员含4个保守的半胱氨酸(cysteine, C)根据其N端半胱氨酸的排列方式,可分为CXC、CC、C、CX3C四个亚族。

 

Absin趋化性细胞因子类重组蛋白产品清单

货号

产品名称

规格

abs00810

Recombinant Human IL-8,72a.a.

5ug

abs04159

Recombinant Mouse CXCL12 Protein

10ug

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6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)

由于在体内外均可直接杀伤肿瘤细胞而得名。主要成员包括:

1)TNF-α,一种单核因子主要由单核细胞和巨噬细胞产生;

2)TNF-β,一种淋巴因子,主要由淋巴细胞、NK细胞等产生,其生物学活性与TNF-α相类似。

 

Absin肿瘤坏死因子类重组蛋白产品清单

货号

产品名称

规格

abs04294

Recombinant Mouse TNFSF11 Protein

10ug

abs05092

Recombinant Human TNF-α Protein

50ug

abs05160

Recombinant Human TNF-α Protein

100ug

abs04232

Recombinant Human TNF-α Protein

10ug

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7、CD抗原类

白细胞表面的抗原被称为CD抗原(亦称白细胞分化抗原),其对生物体的免疫反应起着重要的作用。随着淋巴细胞成熟,他们在细胞表面表达不同的蛋白质受体,它可以帮助确定被检查细胞的类型和成熟阶段。

 

Absin CD抗原类重组蛋白产品清单

货号

产品名称

规格

abs04571

Recombinant Mouse CD275 Protein(C-6His)

10ug

abs04611

Recombinant Human CD58 Protein(C-Fc)

10ug

abs04618

Recombinant Cynomolgus CD274 Protein(C-6His)

10ug

abs04721

Recombinant Human PD-1 Fc Chimera Protein(C-Fc)

25ug

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8、病毒抗原/蛋白

一个完整的病毒粒子由其遗传物质(DNA或RNA)和蛋白外壳构成。构成成熟的病毒粒子的蛋白,即病毒结构蛋白,可能包括核衣壳核心蛋白(gag蛋白)、病毒颗粒内包装的酶(pol蛋白)和膜组分 (env蛋白)。另外,病毒蛋白组还包括了非结构蛋白、调节蛋白和辅助蛋白。这些蛋白在感染细胞时病毒复制以及病毒复制和组装调节中发挥了重要作用。爱必信提供多种重组病毒蛋白,助力病毒研究。

 

Absin病毒抗原/蛋白产品清单

货号

产品名称

规格

abs01313

Recombinant HBV Surface Antigen(adr) Protein

100ug

abs03000

灭活Sabin株脊髓灰质炎病毒1型抗原

25uL

abs03057

重组乙肝病毒表面抗原HBsAg抗原

500ul

abs04732

Recombinant SARS-CoV-2 Spike S1 Protein(C-His)

100ug

 






9、酶和调节子

酶类是在生物系统内发现的生物催化剂,能催化特定的生化过程。大多数酶是具有催化活性的蛋白质,部分RNA分子(核酶)也具有催化活性。发生在所有生物机体内的生物过程都是化学反应,且大多数是由酶调节的。许多遗传性的人类疾病,如白化病和苯bing酮尿症,都是由缺乏特殊的酶引起的。多毒素或活性药物通过抑制特定的酶促反应发挥作用。

 

Absin酶和调节子产品清单

货号

产品名称

规格

abs04301

Recombinant Human PTH Protein(1-84)

10ug

abs04756

Recombinant Human ACE2 Protein(C-His-Avi)

100ug

abs06069

Recombinant Schistosoma Japonicum GST Protein(C-10His)

50ug

 





10、免疫检查点蛋白

免疫检查点(ICP)分子指的是对免疫应答发挥抑制或刺激作用的配体-受体对。免疫检查点在维持免疫稳态和预防自身免疫中起着重要的免疫调节作用。大多数被报道的免疫检查点蛋白表达于适应性免疫系统的细胞,特别是T细胞和先天免疫系统。

 

Absin 免疫检查点蛋白产品清单


货号

产品名称

规格

abs01295

Recombinant Human Galectin-3 Protein

10ug

abs04602

Recombinant Human Galectin 9 Protein(C-6His)

50ug

abs05507

Recombinant Biotinylated Human CTLA4 Protein(Avi Tag,His Tag)

100ug




 

Absin还专业提供多种重组蛋白如细胞间基质蛋白、修饰酶、血管生成素、荧光蛋白、载脂蛋白、脂肪因子、转录因子、CAR-T 相关蛋白、IVD抗原蛋白、免疫球蛋白------- 点击链接查看更多重组蛋白产品

 

Recombinant Human IL-15 Protein(abs05147)

 

白细胞介素-15(IL-15)是1994年发现的一种支持细胞毒性免疫细胞稳态的细胞因子,具有广泛的生物活性。IL-15能刺激活化的T细胞增殖,促进细胞毒性T淋巴细胞(如CD8+)的诱导,促进NK细胞的产生、增殖和活化。因此,IL-15与其他药物如检查点抑制剂、单克隆抗体、化疗、放疗、CAR-T细胞等联合应用于迅速扩大的癌症免疫治疗领域,以靶向多种机制,增强对肿瘤的免疫应答,为控制和治疗癌症提供优势。

 

产品特征:


种属

来源

E.coli

分子量

12kDa(Reducing)

外观

冻干粉

序列

Asn49-Ser162

NWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGD
ASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS

纯度

>95% SDS-PAGE

内毒素水平

<1EU/μg(LAL)

活性

EC50<1ng/mL




 

实验结果

 

剂量依赖性刺激CTLL-2增殖的EC50<1ng/mL


Absin产品线:

爆款产品:试剂盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化检测、残留检测、多因子检测);细胞培养(类器官试剂盒+基质胶,胎牛血清+培养添加剂+细胞因子)、分化试剂盒;分子(mRNA合成服务+提取试剂盒);化合物大包装;辅助试剂、耗材/仪器、定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...

特色产品:鸡胚提取物CEE、B27、N2、霍乱毒素B亚单位CTB、牛脑垂体提取物BPE、百日咳毒素PTX、重组人胰岛素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...


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