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NLuc荧光素酶检测试剂盒

简要描述:NLuc Reporter Gene Assay Kit提供了一种简单的、可单次添加的试剂,具有灵敏度高的特点,它可在 NLuc萤光素酶存在的情况下产生较强信号。

  • 产品型号:abs60616
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2025-04-22
  • 访  问  量:128

详细介绍

品牌absin货号abs60616
规格abs60616供货周期现货
主要用途科研
产品描述
描述

NLuc荧光素酶是一种经基因工程改造的小分子酶(19.1kDa),是生物发光报告基因蛋白。 它比萤火虫(Photinus pyralis)或海肾荧光素酶亮约 150 倍,使用一种新型的腔肠素类似物(Furimazine) 可产生高强度、辉光型发光信号。该发光反应不依赖 ATP,同时通过抑制本底发光信号而获得最高的检测灵敏度。
NLuc Reporter Gene Assay Kit提供了一种简单的、可单次添加的试剂,具有灵敏度高的特点,它可在 NLuc萤光素酶存在的情况下产生较强信号。
产品组分:

组分名称500T
ANLuc检测缓冲液50mL
BNLuc检测底物(50×)1mL
使用方法
1、自备材料:
PBS;多道排枪;白色不透光/黑色细胞培养板;化学发光仪或酶标仪。
2、检测前准备:
(1)预先将NLuc检测底物(50×)和NLuc检测底物缓冲液放置于室温。
(2)根据实际使用量,以1:50的比例将适量的NLuc检测底物(50×)与NLuc检测底物缓冲液混匀,室温避光备用。例如:如果需要10 mL反应液,则需要加入0.2 mL的检测底物。
注:建议现配现用,剩余的含有新型底物的反应液在当次实验结束后不建议留存。
3、操作方法:
(1)从细胞培养箱中取出细胞培养板,放置5-15 min,恢复至室温。
注:使用白色不透光或者黑色的细胞培养板,减少孔间的信号干扰。
(2)加入检测溶液
使用多道排枪向每个细胞孔中加入平衡至室温的含有底物的反应液,加样体积与细胞培养液体积相同并混匀。例如,96孔板通常加入80-100μL 培养液,相应加入80μL-100μL检测溶液;384孔板通常加入20-30μL 培养液,相应加入20-30μL检测溶液。
(3)发光检测
混匀后于化学发光仪或酶标仪中检测NLuc荧光素酶报告基因活性。
注:为得到最佳检测结果,请在加入检测试剂后1小时内完成检测。
4、分析数据:
(1)实验设计:根据不同实验目的,在每个培养板中都应设置对照组、实验组和空白对照组。为了保证实验准确性,理论上每个实验组(包括对照组)都应当减去空白对照组的萤火虫萤光素酶的发光测量值。
①空白对照组:
背景F:未转染细胞+反应液。
注:空白对照组的样品量必须与实验样品量相同,包含与实验样品相同的培养基/血清组合,并加上相同的检测试剂。
②实验组:转染细胞经实验化合物处理(即实验组F)。
③对照组:转染细胞不经处理,用以标准化结果(即对照组F)。
(2)计算结果:
实验组=实验组F-背景F。
对照组=对照组F-背景F。
表达倍数=实验组/对照组。
储存/保存方法
-20℃保存,有效期一年。NLuc检测底物(50×)建议分装-80℃保存。
注意事项
1、酶促反应对温度较为敏感,加样检测前务必将所有试剂平衡至室温(20-25 ℃)再使用;
2、检测时需使用白色或黑色的96孔板。如果使用普通透明的96孔板,相邻孔之间会产生相互干扰;
3、检测仪器:能检测化学发光的仪器都适用,但由于不同仪器的设置和灵敏度不同,测得的光信号值也会不同;
4、单管荧光测定仪测定,每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致;
5、为了您的自身安全,实验前请做好有效防护;
实验结果图
温馨提示:本产品仅作科研实验使用,不支持临床等研究


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