详细介绍
品牌 | absin | 货号 | abs50057 |
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规格 | 50mL×2 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 |
产品描述 | |
描述 | 3D细胞培养物在生理上更相关,并且能更好地代表体内组织,可以更准确地预测药物治疗的功效或毒性。3D细胞模型越来越多地用于了解疾病机理和发现药物疗法。与2D培养相比,3D细胞培养可以更准确地预测药物治疗的功效或毒性。 3D Luminescent Cell Viability Assay是一种基于荧光素酶系统的细胞活力检测试剂,借助ATP依赖的荧光素酶催化的荧光素发光反应,通过化学发光信号测定细胞内ATP含量,从而检测细胞活力。检测线性范围宽、灵敏度高、稳定性好。 本试剂盒中由于高纯度的荧光素底物、热稳定的荧光素酶和经过优化的反应试剂,使得本产品具有更强的细胞裂解能力,可用于3D微组织培养的细胞活力分析。在细胞培养物中加入本产品使细胞团裂解,释放出ATP,即可产生如图所示的反应,发出稳定的光信号。发光强度与ATP的量,即活细胞数量在一定范围内成正比,因此本品可对活细胞数目进行定量检测。 ![]() 产品特性: 3D Luminescent Cell Viability Assay检测灵敏度高、线性范围宽,可兼容少量样品检测以及大量样品的高通量筛选。 1、方便快速:试剂盒中提供的检测试剂为即用型,读数稳定,检测速度快,完成检测仅需约 10 分钟; 2、灵敏度高:应用于 3D 微组织检测具有更高的信噪比; 3、快速:添加试剂后可在 30min 或更短时间内记录数据; 4、发光信号更稳定:发光信号半衰期超稳定,通常>3 小时。 5、裂解能力更强:经过优化的反应试剂具有更强的细胞裂解能力,适用于 3D 微组织培养的细胞活力分析; 6、高通量:可兼容少量样品检测以及大量样品的高通量筛选。 |
应用 | 适用于生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖、细胞毒性试验等。 |
使用方法 | 试剂准备: 1、试剂融化:实验前一天将试剂取出,置于 4℃过夜融化。也可在实验当天将试剂取出,置于室温融化,或放置于 22℃水浴融化,但需要注意水温不可超过 25℃。 2、平衡至室温:若试剂在非室温条件下融化,使用前可将其置于 22℃水浴,确保试剂平衡至室温后再用于检测。注:一般针对 5mL 包装需要约 10min;50mL 包装需要约 20min。 3、混匀:使用前轻柔颠倒 5 次使溶液混合均匀。 检测步骤: 1、 使用适合进行化学发光检测的 96 孔板,在其中加入含有细胞培养基的微组织。 注:(1)制备样品体积和微组织特性(例如,大小、数量、培养天数等)应针对实验条件进行优化;(2)样品的总 ATP 含量应保持在 10μM 以下(测定线性范围上限浓度);(3)多孔板必须与使用的光度计兼容。 2、 将测试化合物添加到实验孔中,并根据您的培养方案进行孵育。 注:确保样品和测试化合物的体积足够低,以允许添加等体积的试剂,然后进行混合,而不会造成孔间污染。 3、 将板及其内容物平衡至室温(22-25℃)约 30 分钟。 4、 添加与每个孔中存在的细胞培养基体积相等的 3D Reagent 至检测孔中(例如,对于 96 孔板,将 100μl 3D Reagent 添加到 100μl 含有细胞的培养基中)。 5、 剧烈混合内容物 5 分钟以诱导细胞裂解。 注意:混合对于从 3D 微组织中有效提取 ATP 非常重要。 6、 让板在室温下再孵育 25分钟以稳定发光信号。 7、 记录发光。 注:板内不均匀的发光信号可能是由温度梯度、细胞接种不均匀或多孔板中的边缘效应引起的。 |
注意事项 | 1、温度:试剂中含有荧光素酶,反复冻融会影响其活性。建议分装后置于-20℃避光保存。试剂及细胞样品使用前均需平衡至室温,以避免酶催化效果的影响; 2、化学因素:荧光素酶的反应速率和发光强度受化学环境影响。不同类型的培养基和血清中发光强度和衰减速率存在差异。另外,药物含量较高时可能会干扰荧光素酶反应,从而影响发光信号。建议设置含有药物的细胞培养液对照孔以排除溶剂的干扰; 3、光敏感:本试剂对光敏感,如果储存时暴露在光照下,会加快发光强度的衰减。如果试剂从原来的容器转移,请确保避光保存; 4、ATP污染:建议操作时佩戴口罩和乳胶手套,避免接触可能受到污染的表面和设备。操作时避免多次将枪头插入试剂瓶中。 |
基本信息 | |
储存/保存方法 | 1、低于-10℃避光保存。为保证最佳使用性能,长期存储时,建议置于-70℃。 2、本品反复冻融6个循环仍可保持稳定。 3、分装可能导致ATP污染风险,避免分装。 |
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