全国服务咨询热线:

Products产品中心
首页 > 产品中心 > 细胞生物学 > 3D/类器官培养 > abs9764Balb/C小鼠正常小肠类器官培养基

Balb/C小鼠正常小肠类器官培养基

简要描述:Balb/C小鼠正常小肠类器官培养基4°C保存,有效期3个月;-20°C保存,有效期1年。
别名:Mouse(balb/C) Small Intestine Organoid Culture

  • 产品型号:abs9764
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-05-21
  • 访  问  量:140

详细介绍

品牌absin货号abs9764
规格100mL;500mL供货周期现货
应用领域化工,生物产业,农业,制药,综合

使用方法:


1、原代 
(1)取材后的Balb/C小鼠正常小肠组织须在2-8°C清洗,准备若干培养皿,加入 4℃预冷的Balb/C小鼠正常小肠类器官组织原代培养缓冲液#abs9731备用(添加双抗和庆da霉素)。
(2)将组织放入培养皿中,利用Balb/C小鼠正常小肠类器官组织原代培养缓冲液清洗三次后,去除杂质,利用眼科剪或手shu刀将Balb/C小鼠小肠组织肠粘膜去除,利用眼科剪或手shu刀将组织jian切成体积约为 10-30mm3的组织块。
(3)组织用Balb/C小鼠正常小肠组织原代zuzhi消化液#abs9644消化,4℃震荡消化20-25min或静置消化40-50min,(消化过程中随时观察消化情况)。
(4)取少量液体在显微镜下观察,镜下观察到较多的隐窝,加入三倍体积Balb/C小鼠正常小肠类器官组织原代培养缓冲液终止消化。
(5)使用100um孔径的筛网进行过滤,将滤液收集后,于300g富集离心5min后移去上清,添加Balb/C小鼠正常小肠类器官组织原代培养缓冲液重新重悬离心。
(6)基质胶计算:第5步后观察收集到的组织体积,添加25倍组织体积的基质胶#abs9495重悬铺板。
(7)24孔细胞培养板为例,每孔点胶25ul组织基质胶混合物进行铺板(4℃下操作)。
(8)将铺好的培养板放入37℃培养箱中10-15min成胶,添加Balb/C小鼠正常小肠类器官培养基(恢复室温)进行培养。


2、类器官传代培养
(1)移液枪吸去培养基,每孔添加1-2ml 4℃类器官传代培养缓冲液#abs9730放置2min。
(2)移液枪轻柔吹打基质胶,收集在15ml离心管中,4℃静置10min。(每6-8孔为一组)
(3)a:类器官数量不足或体积较小时: 离心5min弃去上清,添加适量Balb/C小鼠正常小肠类器官传代培养缓冲液重悬移入1.5ml离心管,300g离心5min弃去液体进行第4步。
         b:类器官数量较多或体积较大时:离心5min弃去上清,添加适量类器官传代消化液#abs9520消化2-3min,添加Balb/C小鼠正常小肠类器官传代培养缓冲液终止消化,离心5min弃去混合液,添加适量Balb/C小鼠正常小肠类器官传代培养缓冲液重悬移入1.5ml离心管,300g离心5min弃去液体进行第4步。
(4)类器官收集后,添加基质胶重悬,每孔25ul基质胶铺在24孔细胞培养板中,放置培养箱中10-15min添加500ulBalb/C小鼠正常小肠类器官培养基


3、类器官冻存
(1)移液枪吸去培养基,每孔添加1-2ml 4℃类器官传代培养缓冲液放置2min。
(2)移液枪轻柔吹打基质胶,收集在15ml离心管中,4℃静置10min。(每6-8孔为一组)
(3)离心5min弃去上清,添加适量Balb/C小鼠正常小肠类器官传代培养缓冲液再次重悬,300g离心5min弃去液体。
(4)添加适量类器官冻存液,轻柔吹打重悬,以24孔细胞培养板为例:密度为2个孔冻存1管,每管体积1.4ml。
(5)做好标记信息,进行程序降温后,移入液氮长期保存。


4、类器官复苏
(1)取10mlBalb/C小鼠正常小肠类器官传代培养缓冲液于15ml离心管中。
(2)从液氮罐中取出冻存的类器官细胞,快速置于 37℃水浴锅中融解。
(3)水浴融解过程中,需轻轻摇动冷冻管,以确保冻存液在 1-2min内wan全融解。
(4)将溶解后的类器官细胞快速转移至15ml 离心管,使用移液管轻轻吹打6-8次,300g 离心 5min,然后除去上清液并收集类器官细胞沉淀。添加适量Balb/C小鼠正常小肠类器官传代培养缓冲液重悬移入1.5ml离心管300g离心5min。
(5)基质胶重悬,每孔25ul基质胶铺在24孔细胞培养板中,放置培养箱中10-15min成胶,添加500ulBalb/C小鼠正常小肠类器官培养基


储存/保存方法:

4°C保存,有效期3个月;-20°C保存,有效期1年。


别名:

Mouse(balb/C) Small Intestine Organoid Culture

产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
爱必信(上海)生物科技有限公司
地址:上海市浦东新区新浩路58号申江科创园18栋
邮箱:wulan@absin.cn
传真:
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息