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血浆血清外泌体提取试剂盒

简要描述:外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒,本血浆血清外泌体提取试剂盒,组分经过优化处理,适用于血清/血浆中的外泌体提取,可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒。

  • 产品型号:abs50039
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-07-09
  • 访  问  量:946

详细介绍

品牌absinCAS-
分子式-纯度-
分子量-货号abs50039
规格20T供货周期现货
主要用途适用于血清/血浆中的外泌体提取,可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒应用领域生物产业

描述:

外泌体是由细胞分泌的包含 RNA 和蛋白质的小囊泡(30-150 nm),在血清/血浆中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能,在特定细胞之间传递它们的效应物或信号分子。


外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒,本血浆血清外泌体提取试剂盒,组分经过优化处理,适用于血清/血浆中的外泌体提取,可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒。


产品组分:

组分名称规格保存
Solution A20ml-20℃
Solution B5ml常温
Exosome Purification Filter20 Tubes常温




使用方法:

自备材料:
高速离心机(可达到 12000 rpm 转速),涡旋振荡器;1.5 mL 离心管,PBS 缓冲液、制冰机。


一、样品预处理:
1、离心机在使用前先于 4℃预冷 10 min;
2、取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于 2-8℃条件下进行解冻;如果是新鲜样品,收集样品后置于 2-8℃保存;
3、将样品按照 500 μL /管进行分装,不足部分用 1×PBS 补足至 500 μL。


二、去除杂蛋白:
1、Solution A 从试剂盒中取出后,放置到冰箱冷冻层中至少 1 小时以上,取出预冷的Solution A 置于碎冰上;
2、加 Solution A:在 500 μL 血液样品中加入 400 μL 预冷的 Solution A,立即将离心管盖紧,通过涡旋振荡器充分混匀 30 s;
3、离心去蛋白:将混匀后的样品于 4℃以12000 rpm 离心 20 min,去除样品中的杂蛋白;
4、上清液转移:去除杂蛋白的离心上清液转移至新的 1.5mL 离心管中。


三、提取外泌体:
1、加 Solution B:在去除杂蛋白的离心上清液中加入 120 μL 的 Solution B;
2、溶液混合:加入 Solution B 试剂后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器充分混匀 2 min;再放置于室温下静置 5 min;
3、沉淀外泌体:将装有混合液的离心管于 4℃以 12000 rpm 离心 15 min,弃上清;
4、再次离心:将含有沉淀的离心管再次于 4℃以 12000 rpm 离心 2 min,弃上清(注:尽可能吸净上清液),并将 1.5 mL 离心管于室温下敞口静置 10 min;
5、外泌体重悬:取 200 μL 的 1×PBS 均匀吹打离心沉淀物,待其溶解后,将重悬液转移至新的 1.5 mL 离心管中;
6、收获外泌体颗粒:将含有重悬液的 1.5 mL离心管于 4℃以 12000 rpm 离心 5 min,保留上清液,该上清液中富含外泌体颗粒。
(注:此时可能有较多沉淀,为正常现象)


四、纯化外泌体:
1、外泌体纯化:将收获的外泌体颗粒粗品转入 Exosome Purification Filter(EPF 柱)上室中,于 4℃以 5600 rpm 离心 20 min,离心后收集 EPF 柱管底的液体,此液体即为纯化后的外泌体颗粒;(注:EPF 柱不可重复使用)
2、外泌体的保存:纯化后的外泌体以50-100 μL 进行分装保存于-80℃低温冰箱中,以备后继实验使用。


储存/保存方法:

收到产品后将试剂分开储存,使用前请充分混匀。



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