用于 mIHC 的 TSA520 荧光酪酰胺性能与实验应用解析

用于 mIHC 的 TSA520 荧光酪酰胺性能与实验应用解析

一、什么是 TSA520 染料？

多重荧光免疫组化染料属于酪酰胺信号放大（TSA）体系的荧光底物染料。多重荧光免疫组化染料(TSA520)为 200× 母液。在 HRP 酶催化下，活化后的荧光酪酰胺可与抗原周边蛋白酪氨酸残基发生共价结合，将绿色荧光信号稳定锚定在靶标位点；后续抗体洗脱仅去除一抗、二抗复合物，共价结合的荧光分子不受影响，支持多轮循环染色。该染料激发波长 490 nm，发射波长 520 nm，与 FITC、AF488 滤光片通道匹配，广泛用于多重荧光免疫组化的绿色通道标记。

二、和传统间接免疫荧光染料相比有哪些优势？

传统荧光二抗依靠非共价的抗原抗体结合实现标记，多重染色时受一抗种属严格限制，低丰度靶标信号偏弱。多重荧光免疫组化染料(TSA520)依托酶促共价沉积实现信号放大，检测灵敏度显著提升；标记完成后可洗脱抗体复合物，突破一抗种属限制，可搭配其他 TSA 染料完成多靶标共染。同时共价结合提升荧光稳定性，降低后续洗脱步骤造成的信号丢失，更适合珍贵病理样本的多重标记实验。

三、TSA520 染料可用于哪些实验？

多重荧光免疫组化染料(TSA520)主要配合 HRP 标记二抗开展 mIHC 实验，样本类型包含石蜡切片、组织芯片 TMA，条件优化后也适配冰冻切片、细胞爬片，仅用于科研研究，不可用于临床诊断。典型应用包含肿瘤微环境免疫标志物染色、组织蛋白共定位分析、低丰度靶标蛋白的原位检测，可与其他波长 TSA 染料搭配完成 25 重多重荧光染色，经荧光显微镜或切片扫描仪成像，完成蛋白空间分布与细胞表型分析。使用时母液按 1:200 使用信号放大液现配工作液。

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