马血清：细胞培养中的关键试剂与应用全解析

在实验室的细胞培养间里，科研人员常常会讨论胎牛血清（FBS）这一细胞培养的“黄金标准"，但在这背后，还有一种血清同样重要却常被忽视——马血清。

作为胎牛血清的经济且有效的替代品，马血清在特定细胞培养应用中展现出独te价值。它不仅在成本上更具优势，而且在支持某些特殊细胞类型生长和分化方面表现出zhuo越性能。

一、马血清的概述与特性

马血清，顾名思义，是从健康马匹血液中提取的血清产品。其制备过程通常包括采集马血液、批量混合、分装，最后经过0.1μm微孔滤膜无菌过滤而成。

作为一种复杂的生物混合物，马血清组成成分丰富，包含各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素和无机物等。

这些成分对促进细胞生长或抑制生长活性达到生理平衡至关重要。血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。

与胎牛血清相比，马血清的成分存在明显差异。马血清中的免疫球蛋白水平较低，且血清浓度趋于降低。

这些差异使得马血清在特定应用场景中更具优势，尤其是在神经细胞培养和某些细胞分化研究中。

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二、马血清的核心功能

· 在细胞培养中，马血清提供多种关键功能，维持细胞的正常生长和增殖。

· 马血清能提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

· 其中的结合蛋白能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，可以结合或调变它们所结合的物质活力。

· 在某些情况下，这些结合蛋白质还能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

· 马血清还是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子的来源。它也能起到酸碱度缓冲液的作用，并提供蛋白酶抑制剂，在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

三、马血清的多样化应用场景

1、神经细胞培养

马血清在原代神经细胞的分离和培养中表现出色。研究表明，含10%马血清的DMEM培养基在分离培养BALB/c小鼠原代脑神经细胞时，与添加2%神经细胞生长剂B27的Neurobasall培养基相比，更节省成本，方便廉价。这一发现使得马血清成为大规模神经细胞培养实验的经济选择。

2、细胞分化研究

马血清在多种干细胞分化过程中扮演着重要角色。研究显示，马血清能促进肌原性分化。

在脂肪干细胞向成肌细胞分化的实验中，加入5%马血清能显著缩短诱导时间，提高诱导效率。

马血清还用于人骨髓间充质干细胞向脂肪细胞的分化，添加20%马血清的L-DMEM培养液可有效诱导这一分化过程。

3、微生物培养

在微生物学领域，马血清是支原体培养基的重要添加剂。在《兽药典》中，含马血清的支原体培养基被用于兽用疫苗的支原体检查。

马血清也用于培养幽门螺杆菌，与羊血清和牛血清比较，添加马血清的培养基更易于分装和保存。

4、免疫学研究

马血清在免疫学研究中也有应用。10%的马血清可用来代替FBS，支持体外抗体对绵羊红细胞（SRBC）的反应。这一特性使得马血清在抗体生产和免疫反应研究中具有重要价值。

5、其他应用

马血清还可用于C2异核体的生成、骨髓基质细胞的培养，以及家兔股骨头缺血坏死模型的建立。

其应用范围广泛，覆盖了多个研究领域。

四、马血清的使用指南

1、储存与解冻

马血清需要长期保存时，必须储存于-20℃至-70℃低温冰箱中。在4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。

解冻血清时，应按照逐步解冻法（-20℃至4℃至室温），避免温度变化过大（如-20℃直接至37℃），因为这样容易产生沉淀物。

解冻过程中应随时摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。

2、热灭活处理

主要有热灭活和非热灭活两种形式的马血清。热灭活是血清在56°C条件下，加热30分钟并混合，以灭活补体。

但需注意，血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

3、沉淀物处理

血清解冻后发现有絮状沉淀物时，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。

但不建议直接过滤去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。

五、马血清与胎牛血清的比较选择

在面对马血清与胎牛血清的选择时，研究者需考虑多个因素。

马血清的一个关键优势是其成本更低，是胎牛血清的经济替代品。

然而，马血清成分与胎牛血清不同，马血清浓度趋于降低，并且免疫球蛋白水平低于胎牛血清。

因此，在决定是否使用马血清时，应仔细考虑具体的实验需求和目的。

以下是与胎牛血清比较的对照表：

六、马血清的质量控制与选购建议

选购马血清时，应关注其质量和适用性。每一批次的马血清均应进行检验，以考察其对特定细胞（如Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞）生长的支持情况。

优质马血清应具有低内毒素水平（如≤10EU/ml），无细菌、真菌、支原体等污染物。

还应关注血清的采集地，如新西兰等受监管的供体种群，以保证产品的可追溯性和一致性。

最后，在马血清的选择和使用上，科研人员应当根据自身实验的特定需求，权衡马血清与胎牛血清的优劣。随着生物医学研究不断深入，马血清这一看似普通的试剂，将继续在科学发现的旅程中扮演重要角色。

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