多重免疫组化VS免疫荧光

更新时间：2020-12-17 点击次数：1712

免疫荧光技术（Immunofluorescence technique，IF ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。

多重免疫组化（mIHC）：主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大(Tyramide signal amplification)是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料Alexa Fluor®、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应(酪胺盐在HRP催化H202下形成共价键结合位点)，产生大量的酶促产物，该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基)结合，这样在抗原-抗体结合部位就有大量的生物素沉积，与随后加入的Streptavidin—HRP/荧光基团结合，经几次这样的循环放大，可以结合大量的酶分子or荧光基团，结果使其检测信号得到几何级放大。

mIHC和IP的区别：

	多重免疫组化(mIHC)	免疫荧光(IP)
靶点数量	可同时染色7色（含dapi）	一般标记三种(含dapi)大于三种效果差
一抗种类	同一种属的不同抗体即可满足要求	不同种属的不同抗体
二抗种类	不同种属的不同抗体	连接荧光探针的不同种属二抗
染色策略	分步染色，多次重复进行免疫组化操作	样本抗原的空间位置的差异，需要设计复杂的染色策略。样本/靶点的差异导致染色策略的差异，染色过程复杂、多变
染色效果	高染色分辨率和染色特异性，信号强度更强,更稳定,淬灭时间更长，无背景影响，各靶点的信噪比大大提高，尤其适合组织基于单细胞的定量分析	亮度较弱,容易淬灭,各种抗体间存在互相影响，背景较高，对基于单细胞的定量分析不利。
实验成本	1同一种属的一抗和二抗，价格相对便宜。 2简单的染色策略和无需任何重复的预实验，即可掌握整个染色技术，大大缩小了预实验的材料损耗。 3一抗和二抗工作浓度更低,单次费用更低	1不同种属的抗体价格存在差异，一般种属稀少的价格高。 2不同种属的二抗，价格存在差异，一般稀少的种属价格高。 3寻找合适的染色策略，复杂的多次重复的预实验大大的增加了实验成本
应用范围	二抗具备通用性，因此实验室中所有的研究领域均可使用	二抗不具备通用性，实验室中应用领域受到局限

相关产品和服务推荐：

多重荧光免疫组化染色试剂盒

多重荧光免疫组化服务

货号	产品名称
abs50012	四色多重荧光免疫组化染色试剂盒(鼠兔通用二抗）
abs50013	五色多重荧光免疫组化染色试剂盒（鼠兔通用二抗）
abs50014	六色多重荧光免疫组化染色试剂盒（鼠兔通用二抗）
abs50015	七色多重荧光免疫组化染色试剂盒（鼠兔通用二抗）
abs50028	四色多重荧光免疫组化染色试剂盒(抗兔二抗）
abs50029	五色多重荧光免疫组化染色试剂盒（抗兔二抗）
abs50030	六色多重荧光免疫组化染色试剂盒（抗兔二抗）
abs50031	七色多重荧光免疫组化染色试剂盒（抗兔二抗）

Absin特色产品线(全部现货)：
WB相关：ECL发光液、预染marker、预制胶；IHC相关：二抗试剂盒、组化笔；IP/CoIP试剂盒；激动剂/抑制剂；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡试剂盒；呼吸爆发试剂盒；ELISA试剂盒；重组蛋白；抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体；定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)...