细胞培养是个辛苦活，根本离不了人。新冠病毒肺炎疫情之下，不知道您实验室里养的细胞可还好？当然，合理运用细胞冻存和复苏技术可以帮助您省心度过假期。不过也有不少小伙伴向小爱哭诉，自己辛辛苦苦养的细胞冻存复苏后失活，复苏出来后活着的细胞就没几个了……辛辛苦苦好一阵、一夜回到解放前的感觉不好受，那么细胞冻存复苏后失活的原因为何呢？我们又该如何去规避呢？其实目前实验室进行细胞冻存大多采用10%DMSO或甘油+10%到20%牛血清+培养基作为细胞冻存液，这种非玻璃化冻存的方式，操作中我们...

我们做实验的时候，会发现做免疫组化整张片子染的脏脏的一片红的情况，而这其中有很多原因。以下是对免疫组化一片红的总结：抗体用了多抗?一抗用多抗很容易出现非特异性染色，建议用高纯度的针对更具特异性抗原决定簇的单抗来解决。单抗很贵，不过效果很好。尤其是背景非特异性染色不会太深。真是一分价钱一分货。一抗过期也会造成悲剧，所以要注意抗体的有效期。抗体浓度过高/孵育时间过长一抗浓度太高也是出现非特异性染色的常见原因。解决的办法就是预实验。每次使用新抗体前应该多做预实验，摸索出理想的工作浓...

一眨眼已经到了三月中旬了，想必各位老师渡过了一个学生时代长的寒假，假是放舒服了，可这实验可怎么办呢，怎么样才能快速结束自己的实验并有一个好的结果呢，小爱不忍大家在家里着急上火，献给大家小爱六字真言：多色组化服务！多重荧光免疫组化(mIHC)实验原理TSA技术(TyramideSignalAmplification™，酪胺信号放大技术):简单来说，用该方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素)，来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HR...

白细胞介素8（interleutin-8，IL-8）是一种趋化性细胞因子（chemokinechenmotacticcytokine，CKC），属于CXC-alpha亚家族，在正常人体内，主要是由单核细胞、免疫细胞、上皮细胞等分泌，参与炎症和体内免疫防御，其受体（CXCR）是由59和67kDa两个亚单位组成的二聚体糖蛋白，属于G蛋白偶联受体超家族，分别由CXCR1,CXCR2两个亚型，然而有研究表明，肿瘤细胞本身也可分泌IL-8，IL-8也可促进肿瘤的发生，目前的研究证明在鼻...

间充质干细胞（MSCs）是一类具有自我更新、多向分化、免疫调节功能的干细胞，能够从骨髓、脂肪、脐血等组织中分离得到。程序性死亡分子1（PD-1）/程序性死亡分子1配体（PD-L1）信号通路在免疫反应的负性调控和维持外周免疫耐受中发挥着重要作用。近年来，PD-1/PD-L1信号通路在MSCs中的作用逐渐受到重视。间充质干细胞（mesenchymalstemcells，MSCs）是非造血基质起源的罕见细胞，位于骨髓（bonemarrow，BM）和多种其他组织中，能够分化成中胚层来...

脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁外壁的组成成分，主要由脂质和多糖构成。LPS的结构如下图所示:左面为O抗原，中间为核心多糖，右面为类脂A.图1.脂多糖结构示意图脂多糖是一种常见的内毒素(Endotoxin)，在体内可以通过细胞信号转导系统激活单核巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞等，合成和释放多种细胞因子和炎性介质，进而引起机体一系列的反应。其主要作用机理已研究的较为透彻，如图2所示，当LPS进入机体入血后，脂多糖结合蛋白LBP可以识别L...

免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation，Co-IP）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的，用于研究蛋白质间相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如下图所示，如果用蛋白质A的抗体免疫沉淀A，那么与A在体内结合的蛋白质B也能沉淀下来。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。爱必信生物爆款...

【技术原理】多重免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大(Tyramidesignalamplification)是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor®、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应(酪胺盐在HRP催化H202下形成共价键结合位点)，产生大量的酶促产物，该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨...