H9C2为大鼠心肌细胞,是心肌损伤、氧化应激、心血管相关模型研究常用贴壁细胞。细胞呈长梭形/纺锤形,严格贴壁、间隙极小、局部会轻微层叠扎堆,该细胞对血清、培养基糖浓度敏感,传代密度把控不当易出现堆叠老化,分化失控,状态极易受环境、操作、血清质量影响,本文将针对H9C2的细胞培养流程进行梳理和指导。一、细胞复苏1.【准备工作】水浴锅提前预热至37℃;准备9ml培养基在37℃条件下预热;生物安全柜提前使用紫外照射30min;2.【融化】从液氮取出冻存管,37℃水浴快速摇晃融化,约...
导语:想研究激素抵抗型重症哮喘?用屋尘螨(Dermatophagoidespteronyssinus,Derp)。想研究气道纤维化与重塑?用粉尘螨(Dermatophagoidesfarinae,Derf)。想模拟临床普遍的双重致敏人群?1:1混合。选错尘螨,轻则表型不符,重则结论偏差——本文讲清体外/体内全流程、双螨差异及避坑要点,结合ELV34脂质介质抗炎抗衰老前沿研究,助你一次造模成功。一、为什么选择尘螨模型?——比OVA更贴近临床屋尘螨(Derp)和粉尘螨(Derf)...
外泌体是细胞经由胞内多泡体与细胞膜融合后释放至胞外的纳米级囊泡,直径范围30–150nm,广泛存在于细胞培养液、血液、组织液、尿液等各类体液中。囊泡内部包裹mRNA、microRNA、蛋白质、脂质、细胞因子等生物活性物质,可作为细胞间信息传递载体,参与免疫调节、组织修复、肿瘤微环境构建、血管新生等多种生理与病理过程。外泌体培养中常会遇到外泌体产量低,活性差,杂蛋白&内源外泌体污染等问题,由于外泌体是细胞分泌的产物,因此细胞培养过程对于外泌体的培养非常重要。外泌体培养和生产,需...
磁珠外泌体试剂盒的活性与实验重现性,高度依赖于磁珠的均匀悬浮状态。团聚是影响捕获效率和使用寿命的首要问题,日常养护需从保存、操作和清洁三方面系统把控。一、悬浮保存:杜绝静置沉淀磁珠颗粒在重力作用下会自然沉降,但长时间静置会形成紧密沉淀,难以重悬且易导致不可逆团聚。保存方式:试剂盒应始终在推荐温度下直立静置保存,切勿倒置或侧放,以免磁珠附着于瓶盖或管壁,造成浓度偏差。定期混匀:即使处于保存状态,也建议每周将试剂瓶轻缓颠倒混匀数次,确保磁珠在体系中保持相对均匀的分布,避免长期静止...
当下生命科学研究早已告别批量测序的“平均表达”时代,空间转录组、单细胞原位分析成为顶刊持续追捧的核心热点。《Nature》《Cell》《CancerCell》等高分期刊中,解析RNA分子在组织原位的空间分布与表达丰度,已成为研究肿瘤异质性、免疫微环境、神经发育的核心手段。而荧光原位杂交(FISH)作为RNA原位检测的经典技术,长期面临灵敏度不足、特异性差、多靶标检测难等痛点。爱必信GeneScope多色单分子RNA原位检测体系,以创新的探针设计与滚环扩增(RCA)技术为核心,...
关键词:重症肌无力、MG、EAMG、实验性自身免疫性重症肌无力、动物造模、自身免疫性疾病为什么你的EAMG模型总是不稳定?重症肌无力(MyastheniaGravis,MG)是一种以肌肉无力为主要特征的自身免疫性疾病。实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)作为研究MG发病机制和评估新疗法的核心动物模型,已有超过50年的应用历史。然而,一个长期困扰研究者的难题始终存在:模型诱导成功率低、个体差异大、重复性差。抗原来源不同、佐剂剂量不一、注射部位随意——这些看似细微的差异,往往决...
表观遗传失调通常与人类疾病,特别是与癌症有关,而各种针对表观遗传调节剂的药物也在如火如荼的开发。组蛋白修饰包括乙酰化,甲基化,泛素化,磷酸化,磺酰化,核糖基化等,其中组蛋白乙酰化修饰始终占据着核心地位。组蛋白乙酰化存在三步调控体系:组蛋白乙酰转移酶(HATs)作为“写入器”,向组蛋白赖氨酸残基添加乙酰基团;组蛋白去乙酰化酶(HDACs)充当“擦除器”,去除乙酰修饰以逆转该过程;溴结构域(Bromodomains)等蛋白模块则作为“读取器”,特异性结合乙酰化位点,介导染色质状态...
做蛋白表达的科研人,谁没被传统原核表达折腾过?构建载体、转化感受态、摇菌培养、诱导过夜,一套流程走完动辄3-7天;AI批量设计上百条突变序列,逐个体内验证周期遥遥无期;毒性蛋白、膜蛋白在活菌系统里极易表达失败、产量低迷;想要小量快速筛变体,大批量培养既费耗材又耗人力……这些研发卡点,如今靠爱必信大肠杆菌无细胞蛋白合成试剂盒有望一键解决。传统蛋白表达流程一、跳出活菌束缚,重新定义蛋白表达速度什么是无细胞蛋白合成?无细胞蛋白合成脱离活细胞培养,把细胞裂解,去除细胞膜、基因组冗余结...
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