细胞冻存是细胞培养的重要环节之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。细胞冻存技术要点是慢冻，标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min。我们常用的传统方法是将冻存管置于4℃30分钟----20℃60分钟----80...

什么是过氧化物酶链霉亲和素(PeroxidaseStreptavidin,SA-HRP)？链霉亲和素（Streptavidin，简称SA）是从细菌阿维丁链霉菌中纯化出的一种60kDa的蛋白质。链霉亲和素同源四聚体对生物素（即维生素B7）具有很高的亲和力。而过氧化物酶链霉亲和素就是将过氧化物酶（HorseradishPeroxidase，缩写为HRP）偶联在链霉亲和素上形成，可与Biotin标记的各种亲和纯化抗体或者Biotin标记的色谱级蛋白联用进行各种免疫检测。SA-HRP...

Q1：转移性的癌类器官，是用转移部位的癌类器官培养基还是原发部位的癌类器官培养基比较好？答：我们查阅大量文献，构建原发肿瘤和转移癌的类器官都是用的适合原发肿瘤的类器官培养基，比如肠癌的原发灶和转移灶，乳腺癌的原发灶与转移灶，所以用原发部位的癌类器官培养基比较好。Q2：转移性的类器官形态和转移部位的癌类器官长得像还是和原发部位的癌类器官长得像？答：转移性的类器官形态和原发性的比较像。Q3：做胰腺癌类器官药筛，对于加药时，类器官的大小有推荐吗？或者说铺板几天后加药比较好呢？答：类...

一、类器官收集及洗涤1、类器官收集移液器吸去培养基，每孔添加1-2mL左右4℃类器官传代培养缓冲液(abs9730)，轻柔吹打基质胶，收集在15mL离心管中（24孔板，每5孔为一组），加类器官传代缓冲液定容至10mL（缓冲液越多，基质胶被稀释的越充分，越容易去除），4℃静置10min或-20℃放置5min（目的是使基质胶软化，如果冰箱保温效果强，冷冻3min），300g4℃，离心5min弃上清。2、类器官清洗添加1mL类器官传代培养缓冲液重悬，300g4℃，离心5min弃上清...

小分子化合物是指分子量小于1000Da（尤其小于500Da），具有生物学活性的化合物。其与细胞因子和蛋白不同，小分子化合物可以透过细胞膜进入细胞，发挥相应的生物学功能。小分子化合物的作用靶点众多，已广泛应用于肿瘤学、免疫学、神经生物学、表观遗传学、干细胞、类器官、细胞凋亡、离子通道和信号转导等生命科学诸多重要的研究领域。小分子化合物主要通过调节其蛋白靶点的活性发挥作用。目前小分子化合物的蛋白靶点主要包括酶、离子通道和受体三大类。表1小分子化合物的分类及作用机制分类作用机制酶的...

微生物污染是一直是细胞培养的一个主要问题，大到诸如细胞间、层流室这种实验室的设计布局，小到每一次试剂外包装的消毒，都是在为了细胞免受外源微生物的侵害。应各位老师们的要求，今天这篇文章主要讲解细胞房的除菌方案，顺便讨论一下常见的无菌操作漏洞。当您和同门的细胞频繁出现污染，更换试剂之后仍然不能改善，细胞丢弃一波又一波，建议为细胞间来场消毒吧。无论是紫外线照射（物理方法）还是甲醛加高锰酸钾熏蒸，都是为了尽可能的杀灭空气中的微生物。图1细胞室一、紫外线照射法紫外线按照波长划分为四个波...

环状(circRNA)是一类特殊的共价闭环RNA分子，在调控生理和病理进程中，通过不同的机理发挥着重要作用。传统上，circRNA被认为是一种非编码RNA(ncRNA)。2014年，在北卡罗来纳大学报导了环形RNA在细胞内可通过非帽依赖的机理来翻译蛋白，人们认识到circRNA也具有编码与表达蛋白的能力。此后，随着体外环化技术的发展，比线性mRNA稳定性更强的合成circRNA成为mRNA治疗领域备受关注的新技术，有望以mRNA药物相似的递送方法，实现疾病的治疗。图1环状RN...

滞育(diapause)是动物受环境条件的诱导所产生的静止状态的一种类型。它常发生于一定的发育阶段，比较稳定，不仅表现为形态发生的停顿和生理活动的降低，而且一经开始必须渡过一定阶段或经某种生理变化后才能结束。动物通过滞育及与之相似但较不稳定的休眠现象来调节生长发育和繁殖的时间，以适应所在地区的季节性变化。2021年1月7日，加拿大的研究人员在Cell杂志发表了题为：ColorectalCancerCellsEnteraDiapause-likeDTPStatetoSurviv...