上一期我们为大家汇总了ELISA实验原理、样本准备和预实验相关的十个常见问题及解答，可能有心急的小伙伴早就想要了解更多后续关于ELISA实验方面的问题了，不要走开，接下来将给您带来相关解答~Q：invivo实验周期长，不太好做预实验，对ELISA结果会有影响么？怎么办？A：如果您实验室之前建立的invivo实验protocol经过验证，可以保证有效性，那么，可以不用再进行相关的预实验；并且，如果实验周期较长，样本获取不易，同时又需要检测较多指标，建议将样品分装冻存，避免反复冻...

脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是所有革兰阴性细菌外膜的主要组成部分,维持了细菌的结构完整性,并保护细菌膜免受某些化学物质的攻击。LPS被称为内毒素,是革兰阴性菌主要致病成分,可引起强烈免疫反应,导致几乎所有的真核细胞发生形态、代谢和基因表达变化,刺激宿主细胞因子失控性表达,发生严重感染。败血症就是由LPS引发的重要疾病之一,败血症发作时,患者体内LPS浓度将极大提高,以至于身体出现灾难性的炎症反应。大量实验证实,LPS、LPS结合蛋白(lipopo-l...

植物血凝素（Phytohaemagglutinin,PHA）是一种发现于植物特别是豆科植物中的凝集素（lectin），属于高分子糖蛋白类，是低聚糖（由半乳糖，N-乙酰葡糖胺和甘露糖所构成）和蛋白质的复合物，具有促进外周血淋巴细胞（PBMC）有丝分裂和诱导干扰素分泌的活性。在生命科学领域，植物血凝素被应用为一种促细胞分裂原（mitogen），在体外能刺激小淋细胞转化成具有免疫活性的淋细胞，并促进其分裂。转化的淋巴细胞能分泌各种淋巴因子。主要应用如下：1、PHA对外周周血淋巴细胞...

白细胞介素4（interleutin-4，IL-4），属于红细胞生成素超家族成员，位于活化T细胞，在Th2亚群产生，此外，肥大细胞、IL2刺激小鼠T细胞系2.19、ConA刺激人Th克隆2F1、小鼠胸腺瘤EL-4细胞以及B细胞系CH2均能分泌IL-4，IL4分子量为140kDa，胞膜外区209氨基酸，跨膜区24氨基酸，胞浆区569氨基酸。IL可促使抗原活化的B细胞分裂增殖，但其作用较IL-2稍弱，而IL-4能促使静止的B细胞表达MHCⅡ类分子、FcεRⅡ/CD23和CD40的...

二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体，根据实验需求，二抗上通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以广泛应用，如WB/ELISA/IHC/IP等。二抗针对某一特定物种的所有抗体均具有特异性，因而使用特定标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记，大大节省了时间和费用；此外，一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子，从而使信号大大增强，提高了实验灵敏度。二抗，广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体...

【细胞因子】细胞因子是细胞分泌的一种小的信号蛋白，对细胞间的相互作用和通讯有特殊的影响。细胞因子调节体液和细胞免疫反应之间的平衡，调节特定细胞群的成熟、生长和反应。一些细胞因子以复杂的方式增强或抑制其他细胞因子的作用。细胞因子通过与特定的细胞表面受体结合并激活下游的细胞内信号，从而导致功能或表型的改变。细胞因子主要通过细胞外信号调节多种生物功能，包括先天和后天免疫、造血、炎症和修复以及增殖。细胞因子可能作用于分泌它们的细胞（自分泌作用）、邻近细胞（旁分泌作用）或在某些情况下作...

细胞培养是个辛苦活，根本离不了人。新冠病毒肺炎疫情之下，不知道您实验室里养的细胞可还好？当然，合理运用细胞冻存和复苏技术可以帮助您省心度过假期。不过也有不少小伙伴向小爱哭诉，自己辛辛苦苦养的细胞冻存复苏后失活，复苏出来后活着的细胞就没几个了……辛辛苦苦好一阵、一夜回到解放前的感觉不好受，那么细胞冻存复苏后失活的原因为何呢？我们又该如何去规避呢？其实目前实验室进行细胞冻存大多采用10%DMSO或甘油+10%到20%牛血清+培养基作为细胞冻存液，这种非玻璃化冻存的方式，操作中我们...

我们做实验的时候，会发现做免疫组化整张片子染的脏脏的一片红的情况，而这其中有很多原因。以下是对免疫组化一片红的总结：抗体用了多抗?一抗用多抗很容易出现非特异性染色，建议用高纯度的针对更具特异性抗原决定簇的单抗来解决。单抗很贵，不过效果很好。尤其是背景非特异性染色不会太深。真是一分价钱一分货。一抗过期也会造成悲剧，所以要注意抗体的有效期。抗体浓度过高/孵育时间过长一抗浓度太高也是出现非特异性染色的常见原因。解决的办法就是预实验。每次使用新抗体前应该多做预实验，摸索出理想的工作浓...