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品牌 | absin | 货号 | abs47047374 |
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规格 | 1000U | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 仅限科研使用 |
产品描述:
纤维蛋白酶(Thrombin)来源于牛血浆,分子量37KD,是由两条肽链(31KD和6KD)通过二硫键组成的。Thrombin是蛋白质水解酶,其催化纤维蛋白原(Fibrinogen)水解掉A肽和B肽,由此形成纤维蛋白单体,单体进一步聚合,在血小板、红细胞和白细胞等参与下形成血凝块。
6、性价比及其突出,尤其对于工业客户,国内产品的价格,国际顶尖产品质量。
来源:牛血浆
纯度:2000U/mg
使用方法:
(一)融合蛋白切割由于Thrombin具有切割序列专一性强,水解效率高的特点,它被广泛地应用于基因工程产品的开发,其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂,尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。 Thrombin是一种广泛用于切割标签的蛋白酶,能够有效切质量比仅为1:2000的蛋白。切割可在20℃到37℃之间切割0.3到16小时。Thrombin最佳的切割位点是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',这里X4 和 X3 是疏水氨基酸而X1'和 X2'是非酸性氨基酸,一些经常使用的识别位点是L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和MY-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之间切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他识别位点是 X2-R[K]-X1', 例如A-R-G和G-K-A,这里切割发生在第二个残基后。有效的消化缓冲液是20mM Tris-HCl缓冲液,含150mM氯化钠,pH8.0。Thrombin可从切割产物中用p-氨基琼脂糖亲和纯化,或者苯甲脒琼脂糖移去。
(二)血小板聚集试验 Thrombin与血小板表面的Thrombin受体结合,活化血小板,使血小板粘附和聚集。 血小板聚集实验参照文献:兔血用塑料管收集和用ACD(86 mmol/L柠檬酸钠,111 mmol/L葡萄糖,53 mmol/L柠檬酸)0.15体积比抗凝,200 g离心10 min,离心2次,取上清,800g离心15 min。沉淀中加Tyrode—Hepes缓冲液(140 mmol/L NaCl,5 mmol/L KCl,1 mmol/L MgCl2,10 mmol/L Hepes,10mmol/L葡萄糖,pH 7.4)调节至血小板数为(3~4)×1011/L。血小板聚集用血液凝集仪来测定。血小板悬液(0.2ml )与药物温育1 min,然后用Thrombin(500 u/L)作用5 min,记录聚集情况。
技术指标:
储备溶液可在0.1%(w/v)BSA溶液中以100单位/ml的浓度制备。储备溶液在0–5°C下保持活性一周。由于Thrombin溶液吸附到玻璃上,因此建议将溶液等份放入塑料管中,并在-20°C下储存,以便长期储存。
BSA使用水或PBS配置溶液
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