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产品分类
Product Category详细介绍
| 品牌 | absin | 货号 | abs47047616 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 10mL；50mL | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 常用于细胞凋亡检测及其它 | 应用领域 | 化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药,综合 |
| 产品描述 | |
| 描述 | DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。DAPI，即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride，也称DAPI dihydrochloride，分子式为C16H15N5·2HCl，分子量为350.25，是可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，灵敏度高于EB。 DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。DAPI的激发波长为340nm，发射波长为488nm，DAPI和双链DNA结合后，激发波长为364nm，发射波长为454nm。 |
| 浓度 | 3μM |
| 使用方法 | 悬浮细胞： （1）收集悬浮细胞2×105 ~1×106个细胞，通过离心（通常300-500×g，5分钟）沉淀细胞，弃上清； （2）加入1mL预冷PBS重悬细胞沉淀，再次离心洗涤，去除残留的培养基和其他杂质； （3）（可选）使用4%多聚甲醛（PFA）或其他固定剂，在室温下固定细胞5-15分钟。然后用PBS清洗细胞2次，每次5分钟，去除未结合的固定剂，对于保持细胞形态和结构特别有用。 （4）通过离心沉淀细胞，弃上清，加入1mL DAPI 染色液，轻轻混匀后，室温避光孵育 5-15 分钟。 （6）流式细胞术上机检测（通常不需要清洗，多余的染色液不会显著影响数据质量）；如果使用荧光显微镜观察细胞，建议用PBS洗涤细胞2-3次以去除多余的DAPI染色液，在载玻片上滴一滴抗淬灭封片介质，覆盖盖玻片，避免产生气泡。使用配备有 UV 或蓝色激发光源（358 nm 左右）的荧光显微镜观察，DAPI 的发射光谱峰值约为 461 nm，呈现亮蓝色荧光。 贴壁细胞： （1）（可选）使用4%多聚甲醛（PFA）或其他固定剂，在室温下固定细胞5-15分钟。然后用PBS清洗细胞2次，每次5分钟，去除未结合的固定剂，这一步骤非常重要，因为残留的固定剂可能会影响后续染色的效果。 （2）（可选）使用通透化试剂（如 0.1% Triton X-100）来破坏细胞膜，在室温孵育5-10分钟，使抗体或其他染料更容易进入细胞内部。然后用PBS再次清洗细胞3次。 （3）吸去最后一次洗涤用的PBS，滴加适量的 DAPI 染色液，轻轻摇晃以确保均匀覆盖所有细胞。室温避光孵育5-15分钟。 （4）孵育结束后，用PBS轻轻洗涤细胞2-3次，以去除多余的DAPI染料。注意不要过度洗涤以免损伤细胞或造成染料脱失。 （5）使用荧光显微镜观察细胞，在载玻片上滴一滴抗淬灭封片介质，覆盖盖玻片，避免产生气泡。使用配备有 UV 或蓝色激发光源（358 nm 左右）的荧光显微镜观察，DAPI 的发射光谱峰值约为 461 nm，呈现亮蓝色荧光。 |
| 储存/保存方法 | -20℃，避光，有效期12个月。 |
| 注意事项 | 1、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。 2、避免反复冻融，否则容易失效。 3、DAPI对人体有刺激性，请注意适当防护。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
| 基本信息 | |
| 别名 | DAPI Staining Solution |
| 外观 | 二甲基甲酰胺溶液 |
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