牛痘病毒加帽酶

        牛痘病毒加帽mei，来源于携带牛痘病毒 MR的重组大肠杆菌菌株，由 D1R 和 D12L 两个亚基组成，兼具三种酶活性（RNA 三磷酸酶活性、鸟苷酸转移酶活性和niao嘌呤甲基转移酶活性）。牛痘病毒加帽mei是催化形成帽子结构的有效酶，能特异性地将 7-甲基鸟苷酸帽子结构(m7Gppp，Cap 0) 加至 RNA 的 5'端。帽子结构(Cap 0)对真核生物 mRNA 的稳定、转运和翻译有着重要的作用。通过酶促反应给RNA 加帽是一种有效简单的方法，能显著改善用于体外转录、转染和显微注射的 RNA 的稳定性和翻译能力。
产品组分：

储存缓冲液：
20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.1% Triton X-100, 50% glycerol.
活性定义：
在 37℃条件下，1 h 内将 10 pmol GTP wan全掺入到 80 nt 转录产物所需的酶量定义为 1 个活性单位(U)。

** GTP mix 为 GTP 和少量标记物，其中GTP 使用浓度参照注意事项 3。
（4）37℃孵育 30 min, RNA 5'末端标记完成，可进行后续实验。

-20℃以下保存，避免反复冻融或频繁暴露于温度变化中，shou次使用时建议进行分装。

质量控制：
核酸外切酶活性：10 U的本品和1 μg λ-Hind III digest DNA 在 37℃下反应 16 小时，DNA的电泳谱带不发生变化；
核酸内切酶活性：10 U 的本品和 1 μg λDNA在 37℃下反应 16 小时，DNA 的电泳谱带不发生变化；
切口酶活性：10 U 的本品和 1 μg pBR322 在 37℃下反应 16 小时，DNA 的电泳谱带不发生变化；
RNase活性：10 U的本品和1.6 μg MS2 RNA 在 37℃下反应 4 小时，RNA 的电泳谱带不发生变化；
大肠杆菌 DNA 残留检测：10 U 本品中残留的核酸经 E.coli 16s rDNA 特异性的 TaqMan qPCR 检测，E.coli 基因组残留≤1 拷贝；
细菌内毒素（Endotoxin）：LAL-Test，中国药典 2020 版第四部凝胶限度试验法 通则（1143），细菌内毒素含量≤10 EU/mg。