预染marker高特异性的能力
更新时间：2017-08-18 点击次数：1254
预染marker可直接凝胶上样，无需煮沸。条带清晰 – 亮度类似，但颜色不同的条带便于观察。质量检测 – 每批次均经过SDS-PAGE 和Western blotting 验证。两个参考条带 – 70kDa 为橙色，10kDa 为绿色。与膜兼容 – Western blotting 时彩色条带将转移到膜上应用，监测SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳期间蛋白的迁移。监测Western blotting 蛋白转移到膜上的情况。测定SDS 聚丙烯酰胺凝胶和Western blots 上的蛋白分子量。
预染marker可提高特异性的识别能力。在做westen blot时，用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点可以降低抗体的非特异性结合。封闭剂应该封闭所有未结合位点而不替换膜上的靶蛋白、不结合靶蛋白的标委、也不与抗体或检测试剂有交叉反应。zui常见的封闭剂是BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶和Tween-20(0.05 - 0.1%)稀溶液。
预染marker在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染蛋白分子量的出现方便了我们的实验，这种蛋白分子量标准可以帮助我们在电泳时、电泳后，以及转膜后监测电泳情况和估计迁移率——比如，已知垂直电泳*分辨区域大约在胶的2/3处，如果使用预染Marker就可以预测目标蛋白进入*分辨区时停止电泳以得到*分辨效果;如果观察到Marker电泳异常也可以及时终止电泳;另外在Western Blot转膜以后可以直接观察蛋白转膜是否*，还可以在膜上标记蛋白分子量，所以吸引了许多实验室人员购买预染蛋白标准。
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