PI 通道干扰大？7-AAD 解锁高精度流式细胞活死分选

PI 通道干扰大？7-AAD 解锁高精度流式细胞活死分选

一、什么是 7AAD 溶液？

7-AAD溶液为 50μg/mL 即用型核酸荧光染料，属于非细胞膜通透性探针，优先结合 DNA 的 GC 富集区域。完整活细胞的细胞膜可以阻挡染料进入；晚期凋亡、坏死细胞的细胞膜破损，染料可进入胞内结合 DNA，发出远红色荧光，激发峰值 546 nm，发射峰值 647 nm。试剂 28℃避光储存，染色操作全程避光，主要用于流式细胞术甄别死细胞，仅限科研使用，不可用于临床诊断。

二、和 PI 碘化丙啶相比，7-AAD溶液具备哪些技术差异？

PI 同样为非渗透性死细胞染料，但发射光谱宽，与 FITC、PE 通道荧光重叠大，多色流式补偿压力高；PI 可同时结合 RNA，做细胞周期分析需要额外 RNase 处理。7-AAD溶液发射光谱更窄，处于远红光波段，与 488nm 激发的 FITC、PE 干扰小，更适合多色流式；偏好结合 GC 富集 DNA，不与 RNA 结合。缺点是 7AAD 不适合单独用于细胞周期检测，PI 在该场景更具优势；二者均不能穿透完整活细胞。

三、7AAD 溶液适用于哪些科研实验？

7-AAD溶液仅限科研，不可临床诊断。主要用于流式细胞术细胞活力甄别，常与 AnnexinV 联合开展凋亡检测；适配多色流式免疫分型、细胞毒性实验，可搭配 FITC、PE 等荧光标记。样品需制备成良好单细胞悬液，按照每 1×10⁶细胞添加 5μL 染料，室温避光孵育 515 min，依据细胞类型优化孵育时间；染色完成尽快上机检测。该染料不能用于活细胞标记，也不推荐单独用于细胞周期分析。

产品信息