胶原酶 Ⅴ 型为何成为胰岛原代分离专用优选酶？

一、胶原酶 Ⅴ 型的基本定义是什么？

胶原酶 Ⅴ 型源自溶组织梭菌，属于部分纯化型蛋白水解酶，冻干物活性≥450 units/mg，外观为棕褐色或淡褐色粉末。它作为肽链内切酶，可特异性识别胶原的 Pro-X-Gly-Pro 序列，切割氨基酸与甘氨酸间肽键，也是少数能降解三股超螺旋天然胶原纤维的酶类。该产品胶原酶、酪蛋白活性更高，胰酶含量低，可减少对细胞膜蛋白与受体的破坏，适配脆弱细胞样本处理。

二、胶原酶 Ⅴ 型与其他类型胶原酶有何区别？

商业化胶原酶共分五类，核心差异体现在酶活组分与适用方向。Ⅰ 型酶活均衡，多用于肝脏、肺等组织；Ⅱ 型梭菌蛋白酶活性突出，适配心脏、软骨组织；Ⅲ 型次级蛋白酶活性低，适合乳腺组织；Ⅳ 型胰酶活性极低，用于胰岛细胞初步分离；Ⅴ 型在 Ⅳ 型基础上进一步提升胶原酶与酪蛋白活性，解离效率更强，对细胞受体保护效果更佳，针对性更强。

三、胶原酶 Ⅴ 型可应用于哪些实验？

该产品核心应用为胰岛分离与制备，也可用于对膜蛋白、受体完整性要求高的原代细胞分离实验。实验主要包含两种操作模式：一是组织小片消化，将组织剪碎后，以 50-200U/ml 工作浓度在 37℃摇床孵育 4-18h；二是器官灌注法，适用于完整器官解离，添加 3mM CaCl₂可提升消化效率。消化完成后经筛网过滤、清洗、离心，即可获得活性良好的细胞样本。试剂需 2-8℃干燥保存，-20℃可长期储存，有效期 2 年。

爱必信相关产品推荐