鸡胚提取物（CEE）：细胞培养的“营养源泉”与科研应用全解析

实验台前，一支透明的琥珀色小瓶中被缓缓注入培养基，原本生长缓慢的神经干细胞忽然焕发活力——这或许就是鸡胚提取物创造的细胞培养奇迹。

在细胞培养技术发展的漫长历程中，鸡胚提取物（Chicken Embryo Extract，CEE）曾扮演着至关重要的角色。作为一种从发育中的鸡胚提取的营养物质，它因其丰富的生长因子、氨基酸、矿物质和维生素而备受科学家青睐。

尽管现在化学成分明确的培养基日益普及，但在一些特殊细胞类型的培养中，鸡胚提取物仍然发挥着不ke替代的作用。本文将带您深入了解这一神奇物质的全貌。

01 什么是鸡胚提取物？

鸡胚提取物，简称CEE，是从孵化9-12天的鸡胚中提取得到的生物活性物质。这一时期正是鸡胚器官发生的关键阶段，细胞内含有丰富的生物活性成分。

从成分上看，鸡胚提取物是一种营养极其丰富的天然混合物。分析表明，每100克鸡胚提取物中含蛋白质56.4克，钾、铁、硒分别为819毫克、18.4毫克和139.0微克。

同时富含维生素A、D、B2等多种维生素。这些成分共同构成了细胞生长的优质营养源。

鸡胚提取物的制备过程颇为复杂，需要经过分离、浸渍、离心和过滤等一系列步骤。在这个过程中，如何保持营养成分的完整性和无菌性是一大挑战。

标准化的生产工艺通常使用0.2μm滤膜进行无菌过滤，有些产品还经过超滤处理去除蛋白质和其他杂质，形成透明的琥珀色液体。

02 独特用途

促进特殊细胞类型生长

鸡胚提取物最wei重要的应用是为某些难以培养的细胞类型提供必要的生长支持。研究表明，CEE中含有多种生长因子和大分子核蛋白，能够有效刺激细胞生长和增殖。

在动物细胞培养技术起源初期，科学家就使用鸡胚浸出液作为各种组织细胞的培养添加物。这与现代细胞培养技术发展中对于化学成分不明确的天然补充物的依赖是分不开的。

提供全面营养支持

相比于化学成分明确的培养基，鸡胚提取物提供了一个更为全面的营养成分谱系。它不仅含有已知的营养物质，还包括许多尚未wan全鉴定的生物活性因子。

研究显示，鸡胚提取物的氨基酸模式与人体氨基酸模式高度一致，这意味着其蛋白质成分易于被培养的细胞利用，具有很高的生物利用度。

维持干细胞多能性

在某些干细胞培养体系中，鸡胚提取物显示出独特的价值，能够帮助维持干细胞的未分化状态和自我更新能力。

研究表明，早期鸡胚盘细胞具有分化的多潜能性，可以分化成不同组织细胞，因此鸡胚活性粗提物含有干细胞活性成分的特性。

03 具体实验应用场景

干细胞培养与研究

鸡胚提取物在干细胞研究中有着广泛的应用。实验证实，CEE能成功用于多种特定干细胞类型的扩增，并证明其促进DNA去甲基化的能力。

在神经嵴干细胞（NCSC）培养中，研究人员使用含有鸡胚提取物的特殊神经嵴干细胞培养基（NCSCM）。

神经嵴细胞是一种胚胎发育过程中的过渡性多能细胞，可分化为黑色素细胞、颅面部细胞、软骨细胞、骨细胞等多种细胞谱系。

骨骼肌卫星细胞（肌肉干细胞）的培养也依赖鸡胚提取物。研究显示，在含有0.5%鸡胚提取物的DMEM培养基中，卫星细胞能够良好生长和迁移。

创伤修复研究

在组织工程和再生医学领域，鸡胚提取物展现出促进创伤修复的潜力。研究发现，鸡胚活性粗提物对于小鼠软组织创伤愈合有显著的促进作用。

实验表明，在昆明小鼠组织缺损创面模型中，涂抹或注射鸡胚活性粗提物的伤口比未处理的对照伤口愈合速度更快。组织学检查结果显示，使用鸡胚提取物的实验组表皮和真皮层细胞修复能力强于对照组。

这类研究为将鸡胚提取物开发成创伤修复治疗产品奠定了基础，尤其考虑到鸡胚来源易获得，具有较大的转化潜力。

营养与免疫学研究

鸡胚提取物在营养学和免疫学研究中也是一类有用的工具。研究表明，鸡胚蛋提取物对免疫力低下小鼠的脾淋巴细胞和巨噬细胞功能有积极影响。

具体而言，鸡胚蛋脂溶物（CEPEE）能显著促进脾淋巴细胞增殖并分泌IL-2，而鸡胚蛋水溶物（CEAE）则对巨噬细胞的吞噬能力和分泌NO能力显示出更强的刺激作用。

这些发现表明鸡胚提取物中的不同成分可能分别作用于适应性免疫和先天免疫，具有正向免疫调节作用。

抗氧化研究

鸡胚提取物的抗氧化能力也受到科学家的关注。研究表明，鸡胚提取物能改善小鼠的硒营养不良状态，具有明显的抗氧化作用。

实验发现，给予鸡胚提取物的小鼠全血、脑、肾、肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶活性随着剂量的增加而增强，而丙二醛（MDA）水平则降低。

这表明鸡胚提取物可能通过提高抗氧化酶活性和减少脂质过氧化反应来发挥抗氧化作用。

04 实践操作指南

使用浓度与方法

在实际实验操作中，鸡胚提取物的使用浓度通常为0.1%到2%。具体浓度需根据细胞类型和实验需求进行优化。

以下是不同细胞类型中使用鸡胚提取物的典型浓度参考表：

配制与储存

对于商业提供的冻干鸡胚提取物产品，重新配制时需要遵循特定步骤以确保产品的活性和无菌性：

1. 重新配制：对于冻干产品，需用10毫升无菌组织培养级水重新配制，搅拌混合。

2. 处理沉淀：如果出现沉淀物，在冷却条件下继续搅拌数小时/一夜或超声处理，然后使用3000 x g离心10分钟，并移除颗粒。

3. 过滤：配置后的产品必须通过0.2μm无菌一次性过滤器重新过滤，以保持无菌。

4. 储存：配置完成的鸡胚提取物，在4°C下储存应立即使用，或等份加入工作体积，并在-20至-10°C长期储存，最da限度地减少冻融循环。

注意事项

• 沉淀处理：解冻时可观察到蛋白质沉淀，这属于正常现象，可通过离心去除。

• 无菌操作：尽管商业产品已经过无菌处理，但在使用过程中仍需严格遵守无菌操作原则，避免污染。

• 质量控制：选择有质量保证的产品，如经过ISO9000设施最终处理，并有相关检测报告的产品。

• 应用范围：目前市售的鸡胚提取物产品明确标明“仅供研究使用”，不可用于人类治疗或诊断应用。

鸡胚提取物作为一种从9-12日龄鸡胚中提取的生物活性物质，其丰富的生长因子、氨基酸、矿物质和维生素，使其在干细胞培养、创伤修复研究、免疫调节及抗氧化研究中展现出独te价值。

随着生物技术的不断发展，鸡胚提取物这一经典而珍贵的培养添加物，或许能在未来组织工程和再生医学领域展现出新的应用潜力，继续为科学研究贡献力量。

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