RNA样品保存液：守护RNA完整性的关键技术

科研实验室里，一块刚刚采集的小鼠肝脏组织在室温下静置，而其中的RNA却能在数周后仍保持完整——这背后正是RNA样品保存液的神奇力量。

在基因表达分析、疾病诊断和生命科学研究中，获得高质量、完整性好的RNA是成功的关键第yi步。然而，RNA极易被环境中无处不在的RNase降解，传统方法如液氮冷冻又存在不便。

RNA样品保存液的出现解决了这一难题，它能够迅速渗透细胞，稳定和保护RNA，让研究人员无需立即处理样本或依赖液氮保存。

01 什么是RNA样品保存液？

RNA样品保存液是一种水溶性、无毒的样品储存试剂，能迅速渗透到组织或细胞中，稳定和保护细胞内的RNA。

它的核心作用是抑制RNase活性，防止RNA降解，让研究人员能够摆脱立即处理样本或液氮冷冻的不便。

这类产品通常含有柠檬酸钠、硫酸铵、EDTA二钠等成分，通过多种机制维持RNA完整性：

它们能迅速渗入细胞，灭活RNase酶，保护RNA分子不受降解，同时保持RNA与RNA酶的分离状态。

02 强大功能：RNA保存液能做些什么？

RNA样品保存液的核心优势在于它能让时间“静止"，为RNA样本按下暂停键。

通过即时核糖核酸酶灭活技术，它能在取样瞬间形成保护屏障，确保即使样本在室温下存放一段时间，其中的RNA也不会降解。

使用保存液处理后的样本无需液氮和冷冻保存即可运输，大大方便了临床和野外样品的快速大规模采集。

比如，经RNAlater溶液处理并在-80°C储存的组织可以进行10次冷冻/解冻循环，而不会影响后续分离的RNA质量。

更令人称奇的是，这些保存液与多种下游应用兼容，无论是RT-PCR、Northern杂交，还是高通量测序，都能获得可靠结果。

03 应用场景：哪些实验需要它？

临床与野外采样

在无法立即进行RNA分离的地点收集样品时，RNA保存液显得尤为重要。

它使样本能够在室温下运输至实验室，解决了实地采集的关键难题，尤其适用于临床和野外样品的快速大规模采集。

富含RNA酶的组织研究

对于脾脏、胰脏等富含RNA酶的组织，RNA更容易降解。使用RNA保存液可以确保在这些挑战性样本中依然能保护RNA的完整性。

时间序列实验

当需要在不同时间点收集样品，而无法立即处理每个时间点的样本时，RNA保存液提供了一致的保存条件，保证了实验结果的可靠性。

组织学与分子生物学结合研究

一些RNA保存液（如RNAlater）不仅保护RNA，还能维持组织的组织学特征，使样本同时适用于形态学研究和分子分析。

04 实践指南：如何使用RNA保存液？

组织样本处理

将新鲜组织切成厚度小于0.5厘米的薄片，迅速浸入5倍体积的RNA保存液中。

小器官（如大鼠肾脏、肝脏）可整个保存。必须确保组织wan全浸没，否则未被浸泡的部分RNA将无法受到保护。

细胞样本处理

离心收集细胞沉淀，用少量PBS重悬，然后加入5-10倍体积的RNA保存液，混匀即可。

保存温度与时间

不同的保存温度对应不同的保存时间，正确的温度选择对RNA完整性至关重要：

值得注意的是，RNAwait在-20°C时仍为液态，而RNAlater处理的组织在-80°C下长期保存后，RNA仍能保持完整性。

RNA提取流程

从保存液中取出样本，用吸水纸吸去残留液体后，即可像处理新鲜样本一样进行RNA提取。

残留的少量保存液不会影响后续RNA提取的质量。

05 技术进阶：特殊样本处理策略

血液样本

血样因含有大量球蛋白mRNA而难以处理，球蛋白mRNA会干扰下游表达检测。

Tempus血液RNA管含稳定裂解试剂，可直接稳定全血总RNA。

LeukoLOCK系统则通过过滤去除红细胞，获得无球蛋白mRNA的RNA。

植物样本

许多植物组织可直接浸泡保存，但有些植物具有蜡质保护层，需先破坏蜡质层，便于保存液渗透。

细菌与酵母

对于细菌，RNAstable可以保存一个月而不影响RNA提取。

酵母细胞需离心后重悬于RNAstable中，25°C可保存8小时，4°C可保存一周。

冷冻组织

RNAlater-ICE是专门为冷冻组织设计的解决方案，它能防止组织解冻过程中的RNA降解。

只需将冷冻组织放入RNA-ICE溶液中，解冻后即可像新鲜组织一样处理。

07 前景展望：RNA保存液的未来发展

随着单细胞转录组学、空间转录组学和精准医疗的快速发展，RNA样品保存液的重要性将愈发凸显。

未来趋势包括：

• 更长的室温保存时间，便于样品国际运输与共享

• 同时保护RNA、DNA和蛋白质的多功能保存液

• 适用于微量样本的超高效保存液

• 与自动化提取系统更兼容的配方

这些进步将进一步推动分子生物学研究的发展和临床应用的转化。

回想一下那些为液氮运输而焦头烂额的日子，或者因为RNA降解而不得不重新取样的经历。RNA样品保存液不仅解决了这些困境，更赋予了实验设计前所wei有的灵活性。

未来，随着技术的进步，我们可能会看到保存时间更长、适用样本更广的保存液，甚至能够同时保护RNA、DNA和蛋白质的多功能保存液，为多层次组学研究提供支撑。

无论是探索基因表达的奥秘，还是开发疾病诊断的新方法，RNA样品保存液都将是科研人员手中不ke或缺的强大工具。

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