Nature子刊力证：牛磺酸精准检测方案，解锁疾病研究新机制

背景介绍

牛磺酸（2-氨基乙磺酸）是半胱氨酸的脱羧产物，是动物体内很丰富的游离氨基酸之一，具有膜稳定、神经传递和炎症等多种生理功能。它普遍分布在哺乳动物组织中，特别是心脏、大脑和白细胞中。

研究发现，牛磺酸在多种脑损伤模型中可能表现出神经保护作用，包括缺血性脑卒中和炎症。此外，牛磺酸作为很丰富的氨基酸之一，可以重塑肠道菌群，增强抗感染能力，增强抗肿瘤免疫力。牛磺酸在疾病治疗的潜在影响是一个越来越受关注的领域。

牛磺酸含量检测在科学研究中的应用

一、肥胖治疗研究：生酮饮食诱导的胆汁酸通过减少卡路里吸收来预防肥胖

在这篇题为《Ketogenic diet-induced bile acids protect against obesity through reduced calorie absorption》的研究中（IF：18.9），牛磺酸含量检测试剂盒用于定量检测小鼠血清中的游离牛磺酸水平（图1），验证生酮饮食（KD）或甲硫氨酸补充饮食（KDM）对血清游离牛磺酸含量的影响，进而排除游离牛磺酸含量变化对牛磺酸结合胆汁酸（如 TDCA、TUDCA）循环的干扰。

图1  血清游离牛磺酸水平（各组进行五次生物学重复）^[1]。

二、动脉瘤性蛛网膜下腔出血（aSAH）治疗研究：牛磺酸通过调节GABAB/AKT/GSK 3β/β-catenin途径减轻蛛网膜下出血后神经元铁性下垂

在这篇题为《Taurine attenuates neuronal ferroptosis by regulating GABAB/AKT/GSK3β/β-catenin pathway after subarachnoid hemorrhage》的研究中（IF：8.101），牛磺酸含量检测试剂盒 用于定量分析人脑脊液（CSF）中的牛磺酸浓度，是研究的关键起点之一。研究者发现 SAH 患者脑脊液中的牛磺酸水平显著低于对照组（图2）。这一结果为后续研究提供了临床依据，说明牛磺酸可能与 SAH 后的神经保护机制相关。

图2  正常人和SAH患者CSF样本中牛磺酸的水平^[2]

三、炎症性肠病 （IBD）治疗研究：上皮NSD2维持FMO介导的牛磺酸生物合成，防止肠道屏障破坏

在这篇题为《Epithelial NSD2 maintains FMO-mediated taurine biosynthesis to prevent intestinal barrier disruption》的研究中（IF：7.9），牛磺酸含量检测试剂盒用于定量分析牛磺酸在肠道上皮细胞（IECs）和细胞系中的浓度变化（图3），确认NSD–H3K36me2–FMO–taurine 通路的存在。证明牛磺酸在维持肠道屏障和抗炎中的重要作用，为牛磺酸作为IBD潜在治疗策略提供实验依据。

图3 使用牛磺酸微板检测试剂盒（n = 4）确定了Nsd 2Vil-KO和Nsd 2Vil-OE小鼠及其同窝小鼠（经过或不经过DSS处理）的内膜异位症中牛磺酸的水平^[3]。

接下来，小爱给大家详细介绍牛磺酸检测试剂盒使用方法

一、试剂盒组分

二、操作步骤：

1、材料和试剂准备

自备材料：酶标仪、蒸馏水、移液器与枪头、研钵、离心机、计时器、烘箱等。

染料工作液：使用前将0.6mL染料试剂B加入到染料试剂A中，混匀。

标准品溶液：向标准品粉末中加入 1mL 蒸馏水充分溶解；取 0.5mL 溶解后的标准品溶液，加入 0.5mL 蒸馏水混匀，最终浓度为 10mmol/L。

注意：试剂盒中的染料易氧化变质，使用前现配现用，尽快用完，不建议长期储存。

2、样本处理

（1）细胞/细菌样本：将细胞或细菌收集至离心管中，离心后弃去上清；向每5×10⁶个细胞/细菌样本中加入0.75mL检测缓冲液I，进行超声破碎（功率20%，超声3秒，间隔10秒，重复30次）；随后加入0.25mL检测缓冲液II，以10,000×g离心10分钟，取上清液转移至新离心管中待检测。

（2）组织样本：称取0.1g组织，加入0.75mL 检测缓冲液 I 匀浆，40℃水浴孵育30分钟，加入 0.25mL 检测缓冲液 II，10,000×g 离心 10 分钟；取上清液转移至新离心管中，待检测。

（3）血清/血浆样本：可直接检测，或用蒸馏水稀释后检测。

3、上样

按照如下表格加样

注意事项：

（1）需对最高浓度标准品进行2倍连续梯度稀释（6-8个点左右），以绘制标准曲线。

（2）不同样本中牛磺酸浓度差异较大，对于未知样本，建议挑选几个样品进行预实验，以确保检测结果处于标准曲线范围内。

4、标准曲线

标准曲线仅用于参考，每次实验都必须做一条新的标准曲线。

检测范围：0.1 mmol/L - 10 mmol/L

常见问题解答：

Q1：试剂盒中的96孔板只有一个，不够实验使用怎么办？

A1：该试剂盒中的96孔板是免费送的，后续实验可以用常规的96孔酶标板代替，也可购买爱必信配套的酶标板（abs7064）。

Q2：试剂盒操作说明书中既有标准曲线法又有公式法，我应该选择哪种计算方式？

A2：两种方式任选一种就可以，公式是简便算法，建议按照标曲计算，会更加准确。需要注意的是，使用标准曲线法，每次实验必须重新绘制标准曲线。

Q3：试剂盒一次用不完，最长能保存多久？

A3：试剂盒中染料(Dye)溶解后易氧化变质，需要现配现用，不建议储存。长期储存可能影响显色读数进而影响检测；如果样本需要分批检测，建议分批收样储存，待样本收齐后统一检测。此外，如因储存时间过久或其他人为原因导致组分不够使用，可与我司联系单独购买试剂盒组分。

引用文献:

[1] Li X, Yang J, Zhou X, et al. Ketogenic diet-induced bile acids protect against obesity through reduced calorie absorption. Nat Metab. 2024;6(7):1397-1414.

[2] Liu C, He P, Guo Y, et al. Taurine attenuates neuronal ferroptosis by regulating GABAB/AKT/GSK3β/β-catenin pathway after subarachnoid hemorrhage. Free Radic Biol Med. 2022;193(Pt 2):795-807.

[3]Xu Y, Xiao X, Ma C, et al. Epithelial NSD2 maintains FMO-mediated taurine biosynthesis to prevent intestinal barrier disruption. Clin Transl Med. 2024;14(12):e70128.

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