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HepG2细胞培养攻略

更新时间:2023-03-02      点击次数:1137

HepG2 细胞是来源于一个15岁白人的肝癌组织;分泌多种血浆蛋白:清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、转铁蛋白等;模式染色体数为55;该细胞在免疫抑制小鼠中不致瘤;是一个合适的转染宿主;表达标志物包括胰岛素受体;胰岛素样生长因子 II (IGF II)受体。呈上皮样;贴壁,传代比例 1:4 - 1:6;营养体系是MEM+10% FBS。




  名称

HepG2(人肝癌细胞)

  形态

上皮样

生长特性

贴壁;传代比例 1:4 - 1:6

营养体系

MEM(abs9503)+10% FBS(abs972)+1% PS(abs9244)



图1 HepG2 人肝癌细胞

首先我们讨论的是HepG2长得怎么才算好呢?相比于其它细胞,HepG2长得相对ugly一些,这个细胞状态好的形态学表现有哪些?我们来看一组对比(图3和图4)。

差的细胞特点:细胞裂解,背景脏;

好的细胞特点:细胞克隆成岛状,背景干净,对比是很鲜明的。




接下来我们讨论一下HepG2细胞消化问题。在体外培养时,该细胞容易聚团呈岛状(如图4所示),且如果长得过满,轻度消化就成片下来,容易成团。


图4 HepG2细胞聚团增殖成呈岛状分布

传代时,怎样才能使HepG2消化成单个细胞?

有两种解决办法:

※ 融合率达到80%即可传代,长太满容易成片脱落;

※ 先用胰酶消化约3分钟,用完培终止消化作用,然后用移液管将细胞悬液吸起,将管口稍微用力按在培养瓶底部,用力快速将细胞悬液挤出(可重复一次),可有效减轻细胞聚团。

HepG2是最为常用肝癌细胞系之一,主要用于肝脏研究

肝炎病毒研究:HepG2是常用的研究HBV和HCV细胞系模型,利用CRISPR/Cas9构建基因敲除HepG2的HBV感染细胞模型细胞,为治愈乙肝提供新思路。体外肝癌(HCC)模型:HepG2中p53抑癌基因无突变,因此可用于研究p53与肝细胞癌(HCC)的密切关系,以及HCC的发病、诊治、预防。

药物研究:肝脏是人体内药物代谢的最主要器官,也是重要的解毒器官。HepG2细胞系无论在形态上还是功能上都更接近于人的肝组织,该细胞系常用于药物代谢和肝毒性研究。

本期讲解就到这里了,下一期您想了解哪种细胞的培养攻略呢?欢迎留言评论哦。如有细胞培养问题,欢迎扫码加入我们微信群哦。

注:图源网络和客户,仅供参考学习用



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